摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词及其英汉对照 | 第7-11页 |
1 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 生物固氮 | 第11-12页 |
1.2 植物内生固氮菌 | 第12-13页 |
1.2.1 植物内生固氮菌的概念 | 第12页 |
1.2.2 植物内生固氮菌的功能 | 第12-13页 |
1.3 生物固氮测定方法 | 第13-14页 |
1.3.1 凯氏定氮法 | 第13页 |
1.3.2 ~(15)N同位素示踪法 | 第13页 |
1.3.3 同位素自然丰度法 | 第13页 |
1.3.4 乙炔还原法 | 第13-14页 |
1.4 微生物多样性研究 | 第14-16页 |
1.4.1 纯培养方法 | 第14-15页 |
1.4.2 非培养技术 | 第15-16页 |
1.5 微生物的分子鉴定 | 第16-17页 |
1.6 农业微生物应用前景 | 第17-18页 |
1.7 野生稻研究意义和概况 | 第18-19页 |
1.8 本研究的目的和内容 | 第19-20页 |
1.9 技术路线 | 第20-21页 |
2 材料和方法 | 第21-35页 |
2.1 实验材料与仪器设备 | 第21页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 培养基 | 第21页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第21页 |
2.2 内生固氮菌的筛选 | 第21-22页 |
2.2.1 样品消毒 | 第21页 |
2.2.2 内生固氮菌分离 | 第21-22页 |
2.3 固氮酶活性检测与鉴定 | 第22-25页 |
2.3.1 乙炔还原法测定固氮酶活性 | 第22-23页 |
2.3.2 同位素丰度法鉴定 | 第23页 |
2.3.3 固氮酶nifH基因检测 | 第23-25页 |
2.4 内生固氮菌多样性分析 | 第25-28页 |
2.4.1 SDS-PAGE全细胞蛋白电泳分析 | 第25-27页 |
2.4.2 IS-PCR插入序列DNA指纹图谱分析 | 第27-28页 |
2.5 系统发育分析 | 第28-29页 |
2.6 菌株生理生化特性研究 | 第29-33页 |
2.6.1 菌株常规理化鉴定 | 第29-30页 |
2.6.2 促生指标鉴定 | 第30-33页 |
2.6.2.1 产铁载体检测 | 第30页 |
2.6.2.2 脱硅定性试验 | 第30-31页 |
2.6.2.3 定量检测分泌植物生长素 | 第31页 |
2.6.2.4 菌株溶磷特性研究 | 第31-32页 |
2.6.2.5 ACC脱氨酶活性测定 | 第32-33页 |
2.7 内生固氮菌在液体条件下固氮初探 | 第33-35页 |
3 结果 | 第35-47页 |
3.1 内生固氮菌的分离与固氮酶活性测定 | 第35-36页 |
3.2 内生固氮菌多样性分析 | 第36-39页 |
3.2.1 SDS-PAGE全细胞蛋白电泳指纹图谱分析 | 第36-37页 |
3.2.2 IS-PCR DNA指纹图谱分析 | 第37-39页 |
3.3 代表菌株系统发育分析 | 第39-41页 |
3.3.1 序列同源性比对 | 第39-40页 |
3.3.2 系统发育树的构建 | 第40-41页 |
3.4 固氮酶nifH基因扩增 | 第41-42页 |
3.5 代表菌株生理生化鉴定结果 | 第42-46页 |
3.5.1 细菌分泌IAA定量测定 | 第43页 |
3.5.2 溶磷脱硅定性检测 | 第43-44页 |
3.5.3 溶磷定量测定及动态分析 | 第44-45页 |
3.5.4 ACC脱氨酶活性检测 | 第45-46页 |
3.6 内生固氮菌液体培养固氮初探 | 第46-47页 |
4 讨论与结论 | 第47-53页 |
4.1 讨论 | 第47-52页 |
4.1.1 野生稻内生固氮菌的物种多样性 | 第47页 |
4.1.2 野生稻内生固氮菌功能和遗传多样性 | 第47-48页 |
4.1.3 细菌的系统发育分析 | 第48-49页 |
4.1.4 nifH基因扩增与固氮酶活 | 第49页 |
4.1.5 内生固氮菌产铁载体 | 第49-50页 |
4.1.6 内生固氮菌产IAA与ACC脱氨酶活性 | 第50-51页 |
4.1.7 内生固氮菌溶磷脱硅 | 第51页 |
4.1.8 内生固氮菌液体固氮条件初探 | 第51-52页 |
4.2 结论 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录A | 第61-62页 |
附录B | 第62页 |