| 主要缩略词中英文对照表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-33页 |
| 一 自噬 | 第15-25页 |
| （一） 自噬简介 | 第15-18页 |
| （二） 自噬信号转导通路 | 第18-23页 |
| （三） 自噬与凋亡的关系 | 第23-24页 |
| （四） 自噬与凋亡共同的信号分子 | 第24-25页 |
| （五） 自噬性死亡与肿瘤的治疗 | 第25页 |
| 二 内质网应激 | 第25-31页 |
| （一） ROS | 第25-26页 |
| （二） 内质网应激信号通路 | 第26-27页 |
| （三） 内质网应激与凋亡的关系 | 第27-30页 |
| （四） 内质网应激与自噬的关系 | 第30-31页 |
| 三 三 萜皂苷Saxifragifolin D（SD）的研究进展 | 第31-32页 |
| 四 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 SD诱导乳腺癌细胞凋亡作用研究 | 第33-56页 |
| 一 研究内容 | 第33页 |
| 二 材料与方法 | 第33-37页 |
| （一） 细胞株 | 第33页 |
| （二） 药品及试剂 | 第33-34页 |
| （三） 实验仪器 | 第34-35页 |
| （四） 主要试剂配制方法 | 第35-37页 |
| 三 实验方法 | 第37-43页 |
| （一） 细胞培养 | 第37页 |
| （二） 细胞体外增殖抑制试验 | 第37-38页 |
| （三） 细胞形态学观察 | 第38页 |
| （四） Hoechst 33258染色试验 | 第38页 |
| （五） 细胞亚显微结构观察 | 第38-39页 |
| （六） 细胞DNA含量分析 | 第39页 |
| （七） 细胞凋亡率检测 | 第39页 |
| （八） 线粒体膜电位检测 | 第39-40页 |
| （九） Western blot免疫印迹试验 | 第40-42页 |
| （十） 数据的统计学处理 | 第42-43页 |
| 四 结果 | 第43-54页 |
| （一） SD 对乳腺癌细胞具有显著的增殖抑制作用 | 第43-44页 |
| （二） SD 诱导MCF-7和MDA-MB-231细胞形态学变化 | 第44-46页 |
| （三） SD 诱导乳腺癌细胞凋亡 | 第46-54页 |
| 五 讨论 | 第54-56页 |
| 第三章 SD诱导乳腺癌细胞自噬作用研究 | 第56-65页 |
| 一 研究内容 | 第56页 |
| 二 材料与方法 | 第56-57页 |
| （一） 细胞株 | 第56页 |
| （二） 药品及试剂 | 第56页 |
| （三） 实验仪器 | 第56页 |
| （四） 主要试剂配制方法 | 第56-57页 |
| 三 实验方法 | 第57-58页 |
| （一） 自噬体观察 | 第57页 |
| （二） MDC 染色试验 | 第57页 |
| （三） 细胞自噬率检测 | 第57-58页 |
| （四） Western blot 免疫印迹方法 | 第58页 |
| （五） 数据的统计学处理 | 第58页 |
| 四 结果 | 第58-63页 |
| （一） SD 诱导 MDA-MB-231 细胞产生自噬体 | 第58-59页 |
| （二） SD 诱导 MDA-MB-231 细胞产生 MDC 染色阳性的自噬体 | 第59-61页 |
| （三） SD 诱导 MDA-MB-231 细胞自噬率增加 | 第61-62页 |
| （四） SD 诱导 MCF-7 和 MDA-MB-231 细胞自噬相关蛋白变化 | 第62-63页 |
| 五 讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 SD 诱导的自噬对乳腺癌细胞凋亡具有促进作用 | 第65-76页 |
| 一 研究内容 | 第65页 |
| 二 材料与方法 | 第65-66页 |
| （一） 细胞株 | 第65页 |
| （二） 药品及试剂 | 第65-66页 |
| （三） 实验仪器 | 第66页 |
| （四） 主要试剂配制方法 | 第66页 |
| 三 实验方法 | 第66-69页 |
| （一） RNA 干扰试验 | 第66-67页 |
| （二） 细胞自噬率检测 | 第67页 |
| （三） 细胞凋亡率检测 | 第67-68页 |
| （四） 细胞体外增殖抑制试验 | 第68页 |
| （五） Western blot 检测 LC3 和 PARP 蛋白的变化 | 第68-69页 |
| （六） 数据的统计学处理 | 第69页 |
| 四 结果 | 第69-74页 |
| （一） RNA 干扰降低细胞 Beclin1 表达水平 | 第69页 |
| （二） BAF 或 Beclin1 siRNA 预处理抑制 SD 诱导的细胞自噬 | 第69-70页 |
| （三） BAF 或 Beclin1 siRNA 预处理抑制 SD 诱导的细胞凋亡 | 第70-72页 |
| （四） BAF 或 Beclin1 siRNA 预处理拮抗 SD 的增殖抑制作用 | 第72-73页 |
| （五） BAF 或 Beclin1 siRNA 预处理抑制 SD 诱导的 LC3 和 PARP 活化 | 第73-74页 |
| 五 讨论 | 第74-76页 |
| 第五章 SD 诱导的细胞自噬和凋亡部分依赖于 ROS 介导的内质网应激 | 第76-95页 |
| 一 研究内容 | 第76页 |
| 二 材料与方法 | 第76-77页 |
| （一） 细胞株 | 第76页 |
| （二） 药品及试剂 | 第76-77页 |
| （三） 实验仪器 | 第77页 |
| （四） 主要试剂配制方法 | 第77页 |
| 三 实验方法 | 第77-81页 |
| （一） 细胞内质网形态观察 | 第77页 |
| （二） 细胞内 ROS 检测 | 第77-78页 |
| （三） 细胞内钙水平检测 | 第78页 |
| （四） RNA 干扰试验 | 第78-79页 |
| （五） 细胞自噬率检测 | 第79-80页 |
| （六） 细胞凋亡率检测 | 第80页 |
| （七） 细胞体外增殖抑制试验 | 第80页 |
| （八） Western blot 检测相关蛋白变化 | 第80-81页 |
| （九） 数据的统计学处理 | 第81页 |
| 四 结果 | 第81-93页 |
| （一） SD 引起细胞内质网形态变化 | 第81-82页 |
| （二） SD 引起细胞内 ROS 水平增加 | 第82-83页 |
| （三） SD 引起细胞内钙离子水平升高 | 第83页 |
| （四） SD 对 MCF-7 和 MDA-MB-231 细胞内质网应激相关蛋白的影响 | 第83-85页 |
| （五） RNA 干扰降低 MDA-MB-231 细胞 IRE1α表达水平 | 第85-86页 |
| （六） TUDCA 或 IRE1α siRNA 预处理抑制 SD 诱导的细胞自噬 | 第86-87页 |
| （七） TUDCA 或 IRE1α siRNA 预处理抑制 SD 诱导的细胞凋亡 | 第87-88页 |
| （八） TUDCA 或 IRE1α siRNA 预处理拮抗 SD 的细胞增殖抑制作用 | 第88-89页 |
| （九） TUDCA 或 IRE1α siRNA 预处理抑制 SD 诱导的 LC3 和 PARP 活化 | 第89-90页 |
| （十） NAC 预处理抑制 SD 诱导的细胞自噬 | 第90-91页 |
| （十一）NAC 预处理抑制 SD 诱导的细胞凋亡 | 第91-92页 |
| （十二）NAC 预处理拮抗 SD 的增殖抑制作用 | 第92页 |
| （十三）NAC 预处理抑制 SD 诱导的 IRE1α、LC3 和 PARP 蛋白变化 | 第92-93页 |
| 五 讨论 | 第93-95页 |
| 第六章 SD 作用前后 MDA-MB-231 细胞的差异蛋白质组学研究 | 第95-110页 |
| 一 本章研究内容 | 第95页 |
| 二 材料与方法 | 第95-97页 |
| （一） 细胞株 | 第95页 |
| （二） 实验仪器 | 第95页 |
| （三） 主要试剂配制方法 | 第95-97页 |
| 三 实验方法 | 第97-99页 |
| （一） 细胞总蛋白的提取和定量 | 第97-98页 |
| （二） 一向等电聚焦 | 第98页 |
| （三） 平衡胶条 | 第98页 |
| （四） 二向 SDS-PAGE 电泳 | 第98页 |
| （五） 银染 | 第98页 |
| （六） 图像扫描与分析 | 第98-99页 |
| （七） 酶解 | 第99页 |
| （八） 质谱鉴定 | 第99页 |
| （九） 差异蛋白质的功能分类和相互作用网络图 | 第99页 |
| （十） Western Blot验证部分差异蛋白 | 第99页 |
| 四 结果 | 第99-108页 |
| （一） SD处理MDA-MB-231细胞前后的双向电泳图谱 | 第99-105页 |
| （二） 质谱鉴定的差异蛋白质功能分类 | 第105页 |
| （三） 质谱鉴定的差异蛋白质网络关系图 | 第105-106页 |
| （四） 部分差异蛋白的验证 | 第106-107页 |
| （五） NAC预处理对SD诱导的氧化还原酶类蛋白表达的影响 | 第107-108页 |
| 五 讨论 | 第108-110页 |
| 第七章 全文结论与展望 | 第110-113页 |
| 一 全文结论 | 第110-112页 |
| 二 研究创新点 | 第112页 |
| 三 研究展望 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-125页 |
| 博士期间撰写论文 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
