摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第14-29页 |
1.1 木薯的特性以及价值 | 第14-18页 |
1.1.1 木薯的定义 | 第14页 |
1.1.2 木薯的特性 | 第14-15页 |
1.1.3 木薯的价值 | 第15页 |
1.1.4 木薯的同化物积累以及光合特性 | 第15-16页 |
1.1.5“源”“库”理论的基本观点以及研究进展 | 第16-18页 |
1.2 植物中转化酶基因家族研究进展 | 第18-21页 |
1.2.1 植物转化酶的分类 | 第18-20页 |
1.2.2 转化酶的结构特征 | 第20-21页 |
1.3 植物转化酶的理化特征 | 第21-26页 |
1.3.1 转化酶的生化特征 | 第21-22页 |
1.3.2 转化酶的生理功能 | 第22-26页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第26-28页 |
1.5 本研究的技术路线 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-44页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第29-33页 |
2.1.1 植物材料 | 第29页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第29页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第29-30页 |
2.1.4 重要药品及试剂的配制 | 第30页 |
2.1.5 大肠杆菌、农杆菌和酵母筛选培养基的配制成分 | 第30-31页 |
2.1.6 植物组培相关培养基 | 第31-32页 |
2.1.7 实验所需引物及其序列 | 第32-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-44页 |
2.2.1 转化酶基因nINV1在酵母中功能互补实验 | 第33-37页 |
2.2.2 nINV1基因启动子的克隆及激素响应分析 | 第37-39页 |
2.2.3 nINV1基因在烟草中的定位实验 | 第39-41页 |
2.2.4 nINV1基因在木薯块根中的过量表达 | 第41-44页 |
3 结果与分析 | 第44-65页 |
3.1 转化酶基因nINV1在酵母中功能互补 | 第44-51页 |
3.1.1 构建酵母功能验证载体 | 第44页 |
3.1.2 转基因酵母菌落PCR鉴定 | 第44-45页 |
3.1.3 转基因酵母功能验证 | 第45-46页 |
3.1.4 转基因酵母中nINV1蛋白的酶学活性分析 | 第46-51页 |
3.2 nINV1启动子的克隆及生物信息学分析 | 第51-57页 |
3.2.1 木薯总DNA提取 | 第51-52页 |
3.2.2 nINV1启动子的克隆 | 第52-53页 |
3.2.3 nINV1启动子的生物信息学分析 | 第53-55页 |
3.2.4 nINV1基因的表达模式分析 | 第55-57页 |
3.3 nINV1蛋白的亚细胞定位 | 第57-59页 |
3.3.1 nINV1基因定位表达载体的构建 | 第57-58页 |
3.3.2 烟草叶片中的定位结果 | 第58-59页 |
3.4 nINV1基因在木薯块根中的过量表达 | 第59-65页 |
3.4.1 构建nINV1基因过量表达载体 | 第59-60页 |
3.4.2 农杆菌中重组质粒pVKH-Patatin-nINV1的鉴定 | 第60-61页 |
3.4.3 转基因木薯筛选培养 | 第61页 |
3.4.4 pVKH-Patatin-nINV1转基因木薯的分子鉴定 | 第61-62页 |
3.4.5 nINV1基因在转基因木薯幼苗根中的表达分析 | 第62-64页 |
3.4.6 转基因木薯碱性/中性转化酶酶活性分析 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-69页 |
4.1 nINV1蛋白的酶学特性分析 | 第65-66页 |
4.2 nINV1启动子生物信息学分析 | 第66-67页 |
4.3 nINV1基因的亚细胞定位 | 第67页 |
4.4 nINV1基因在木薯中的功能分析 | 第67-69页 |
5 结论 | 第69-71页 |
参考 文献 | 第71-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
个人简历 | 第83页 |