摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
引言 | 第7-9页 |
第1章 实验材料和方法 | 第9-19页 |
1.1 材料 | 第9-10页 |
1.1.1 实验动物 | 第9页 |
1.1.2 实验试剂 | 第9-10页 |
1.1.3 实验仪器 | 第10页 |
1.2 实验方法 | 第10-19页 |
1.2.1 兔髓核细胞体外分离培养 | 第10-11页 |
1.2.2 制备细胞爬片 | 第11页 |
1.2.3 髓核细胞鉴定 | 第11-12页 |
1.2.3.1 髓核细胞的形态学观察 | 第11页 |
1.2.3.2 髓核细胞苏木精-伊红染色 | 第11页 |
1.2.3.3 髓核细胞甲苯胺蓝染色 | 第11页 |
1.2.3.4 髓核细胞免疫组织化学染色 | 第11-12页 |
1.2.3.5 髓核细胞免疫荧光染色 | 第12页 |
1.2.4 实验分组 | 第12页 |
1.2.5 细胞增殖活性检测 | 第12-13页 |
1.2.6 细胞内总ROS检测 | 第13页 |
1.2.7 细胞凋亡率检测 | 第13页 |
1.2.8 荧光定量PCR检测Caspase-12和Grp78基因表达 | 第13-15页 |
1.2.8.1 引物的合成 | 第13-14页 |
1.2.8.2 Trizol法提取细胞总RNA | 第14页 |
1.2.8.3 应用Prime Script TM RT reagent Kit进行逆转录 | 第14页 |
1.2.8.4 应用Light Cycler?480 System Real Time PCR扩增仪分析目的基因的表达 | 第14-15页 |
1.2.9 蛋白印迹分析 | 第15-17页 |
1.2.9.1 细胞总蛋白的提取 | 第15-16页 |
1.2.9.2 蛋白浓度测定 | 第16页 |
1.2.9.3 凝胶电泳 | 第16-17页 |
1.2.9.4 转膜 | 第17页 |
1.2.9.5 孵育抗体 | 第17页 |
1.2.9.6 显影 | 第17页 |
1.2.10 统计学分析 | 第17-19页 |
第2章 实验结果 | 第19-28页 |
2.1 兔髓核细胞体外分离培养结果 | 第19-20页 |
2.2 兔髓核细胞鉴定结果 | 第20页 |
2.3 细胞增殖活性检测结果 | 第20-22页 |
2.3.1 各组髓核细胞吸光光度值(OD 值)见表 1.1 | 第21页 |
2.3.2 各组髓核细胞用不同培养基培养 6h 后,经 CCK-8 Kit 检测各组髓核细胞增殖活性见表 1.2 | 第21-22页 |
2.4 细胞内总ROS检测结果 | 第22-23页 |
2.5 细胞凋亡率检测 | 第23-25页 |
2.6 RT-PCT检测各组细胞Caspase-12和Grp78基因表达结果 | 第25-26页 |
2.7 Western-blot检测各组细胞Caspase-12和Grp78表达结果 | 第26-28页 |
第3章 讨论 | 第28-32页 |
第4章 结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
文献综述 | 第36-43页 |
综述参考献 | 第41-43页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |