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高糖诱导髓核细胞凋亡的相关研究

摘要第2-3页
Abstract第3-4页
引言第7-9页
第1章 实验材料和方法第9-19页
    1.1 材料第9-10页
        1.1.1 实验动物第9页
        1.1.2 实验试剂第9-10页
        1.1.3 实验仪器第10页
    1.2 实验方法第10-19页
        1.2.1 兔髓核细胞体外分离培养第10-11页
        1.2.2 制备细胞爬片第11页
        1.2.3 髓核细胞鉴定第11-12页
            1.2.3.1 髓核细胞的形态学观察第11页
            1.2.3.2 髓核细胞苏木精-伊红染色第11页
            1.2.3.3 髓核细胞甲苯胺蓝染色第11页
            1.2.3.4 髓核细胞免疫组织化学染色第11-12页
            1.2.3.5 髓核细胞免疫荧光染色第12页
        1.2.4 实验分组第12页
        1.2.5 细胞增殖活性检测第12-13页
        1.2.6 细胞内总ROS检测第13页
        1.2.7 细胞凋亡率检测第13页
        1.2.8 荧光定量PCR检测Caspase-12和Grp78基因表达第13-15页
            1.2.8.1 引物的合成第13-14页
            1.2.8.2 Trizol法提取细胞总RNA第14页
            1.2.8.3 应用Prime Script TM RT reagent Kit进行逆转录第14页
            1.2.8.4 应用Light Cycler?480 System Real Time PCR扩增仪分析目的基因的表达第14-15页
        1.2.9 蛋白印迹分析第15-17页
            1.2.9.1 细胞总蛋白的提取第15-16页
            1.2.9.2 蛋白浓度测定第16页
            1.2.9.3 凝胶电泳第16-17页
            1.2.9.4 转膜第17页
            1.2.9.5 孵育抗体第17页
            1.2.9.6 显影第17页
        1.2.10 统计学分析第17-19页
第2章 实验结果第19-28页
    2.1 兔髓核细胞体外分离培养结果第19-20页
    2.2 兔髓核细胞鉴定结果第20页
    2.3 细胞增殖活性检测结果第20-22页
        2.3.1 各组髓核细胞吸光光度值(OD 值)见表 1.1第21页
        2.3.2 各组髓核细胞用不同培养基培养 6h 后,经 CCK-8 Kit 检测各组髓核细胞增殖活性见表 1.2第21-22页
    2.4 细胞内总ROS检测结果第22-23页
    2.5 细胞凋亡率检测第23-25页
    2.6 RT-PCT检测各组细胞Caspase-12和Grp78基因表达结果第25-26页
    2.7 Western-blot检测各组细胞Caspase-12和Grp78表达结果第26-28页
第3章 讨论第28-32页
第4章 结论第32-33页
参考文献第33-36页
文献综述第36-43页
    综述参考献第41-43页
攻读学位期间的研究成果第43-44页
致谢第44-45页

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