| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第14-25页 |
| 1.1 引言 | 第14页 |
| 1.2 QS系统分类 | 第14-20页 |
| 1.2.1 革兰氏阳性细菌QS系统 | 第15-16页 |
| 1.2.2 革兰氏阴性细菌QS系统 | 第16-18页 |
| 1.2.3 AI-2介导的种间QS系统 | 第18-20页 |
| 1.3 QS系统的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.1 QS效应淬灭 | 第20页 |
| 1.3.2 QS系统调节植物共生菌的互惠作用 | 第20页 |
| 1.3.3 QS系统调节哺乳动物肠道菌群平衡 | 第20页 |
| 1.3.4 提高Ⅱ类细菌素产量 | 第20-21页 |
| 1.3.5 增强生物膜法处理污水的能力 | 第21页 |
| 1.4 乳酸菌维持肠道菌群平衡 | 第21-22页 |
| 1.4.1 与病原微生物竞争营养与空间 | 第22页 |
| 1.4.2 抑制病原菌生长 | 第22页 |
| 1.4.3 提供营养并增强机体免疫力 | 第22页 |
| 1.5 乳酸菌中的QS系统 | 第22-24页 |
| 1.6 本课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 L.plantarum AY01的luxS基因敲除及性状鉴定 | 第25-54页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第25-26页 |
| 2.2.2 实验质粒及引物 | 第26页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.2.4 实验试剂 | 第27页 |
| 2.2.5 培养基及试剂配制 | 第27-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-43页 |
| 2.3.0 AY01△的培养 | 第29页 |
| 2.3.1 温度敏感型质粒基因敲除原理 | 第29-30页 |
| 2.3.2 AY01的luxS敲除 | 第30-32页 |
| 2.3.3 LuxS△1菌株的分子生物学验证 | 第32-33页 |
| 2.3.4 LuxS△1菌株luxS回补 | 第33-39页 |
| 2.3.5 AY01、LuxSA1与HB菌株产AI-2能力的检测 | 第39-40页 |
| 2.3.6 AY01与LuxS△1益生特性比较 | 第40-42页 |
| 2.3.7 荧光定量PCR检测AY01与LuxS△1菌株的基因表达水平差异 | 第42-43页 |
| 2.4 实验结果及分析 | 第43-52页 |
| 2.4.1 AY01 luxS基因的敲除结果及分子验证 | 第43-45页 |
| 2.4.2 LuxSA1的luxS回补 | 第45-47页 |
| 2.4.3 AY01野生型与敲除子的生物发光检测结果 | 第47-48页 |
| 2.4.4 luxS基因对AY01益生特性的影响 | 第48-49页 |
| 2.4.5 AY01与LuxS△1对Caco-2细胞的粘附性 | 第49-50页 |
| 2.4.6 AY01与LuxS△1对EHEC生物膜形成能力的影响 | 第50-51页 |
| 2.4.7 AY01与LuxS△1基因表达差异 | 第51-52页 |
| 讨论 | 第52-53页 |
| 本章小结 | 第53-54页 |
| 第三章 Lb. plantarum YM-4-3中两种luxS基因的异源表达、纯化及活性检测 | 第54-83页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 实验材料 | 第54-57页 |
| 3.2.1 实验菌株与质粒 | 第54页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第54-55页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第55页 |
| 3.2.4 培养基及试剂配制 | 第55-57页 |
| 3.3 实验步骤 | 第57-67页 |
| 3.3.1 使用本地Blast寻找YM-4-3基因组中的luxS序列 | 第57-58页 |
| 3.3.2 luxS1与luxS2的克隆与测序 | 第58页 |
| 3.3.3 LuxS1与LuxS2蛋白一级结构分析 | 第58-59页 |
| 3.3.4 LuxS1与LuxS2的系统发育树构建及二级结构预测 | 第59页 |
| 3.3.5 LuxS1与LuxS2蛋白单体的三级结构预测及同源建模 | 第59-60页 |
| 3.3.6 构建luxS1与luxS2的原核表达载体 | 第60-62页 |
| 3.3.7 luxS1与luxS2的原核表达 | 第62-63页 |
| 3.3.8 LuxS1与LuxS2的纯化条件优化 | 第63-64页 |
| 3.3.9 LuxS1与LuxS2活性检测 | 第64-67页 |
| 3.4 实验结果及分析 | 第67-80页 |
| 3.4.1 luxS1与luxS2的克隆与鉴定 | 第67页 |
| 3.4.2 LuxS1与LuxS2蛋白单体的氨基酸组成特性、等电点预测及亲/疏水性分析 | 第67-70页 |
| 3.4.3 LuxS1与LuxS2的进化树构建及二级结构分析 | 第70-71页 |
| 3.4.4 LuxS1与LuxS2蛋白三级结构分析及同源建模 | 第71-72页 |
| 3.4.5 luxS1与luxS2的原核表达载体构建结果 | 第72-73页 |
| 3.4.6 LuxS1与LuxS2的原核表达 | 第73-74页 |
| 3.4.7 LuxS1与LuxS2纯化条件优化 | 第74-76页 |
| 3.4.8 LuxS1与LuxS2活性检测 | 第76-80页 |
| 讨论 | 第80-82页 |
| 本章小结 | 第82-83页 |
| 总结与展望 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
