| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 综述 | 第12-18页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 结核分枝杆菌特异性基因组区域RDs | 第12-13页 |
| 1.3 潜在特异性抗原——RDs编码蛋白 | 第13-15页 |
| 1.4 RDs在分枝杆菌致病性中的研究 | 第15-16页 |
| 1.5 展望 | 第16-18页 |
| 第2章 前言 | 第18-20页 |
| 第3章 实验材料和方法 | 第20-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 3.1.1 实验菌株、载体和细胞 | 第20页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 3.1.3 培养基和溶液的配制 | 第20-23页 |
| 3.1.4 实验仪器设备 | 第23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 3.2.1 引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| 3.2.2 目的基因的获得 | 第24页 |
| 3.2.3 目的基因rv1515c的TA克隆 | 第24-25页 |
| 3.2.4 大肠杆菌DH5a、BL21和JM109感受态制备及转化 | 第25页 |
| 3.2.4.1 大肠杆菌感受态制备 | 第25页 |
| 3.2.4.2 大肠杆菌的转化(热激法) | 第25页 |
| 3.2.5 Rv1515c重组蛋白的表达 | 第25-27页 |
| 3.2.5.1 Rv1515c重组质粒的构建 | 第25-26页 |
| 3.2.5.2 Rv1515c重组蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第26-27页 |
| 3.2.6 耻垢分枝杆菌感受态制备及转化 | 第27-28页 |
| 3.2.6.1 耻垢分枝杆菌感受态制备 | 第27页 |
| 3.2.6.2 耻垢分枝杆菌电转化 | 第27-28页 |
| 3.2.7 重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达验证(Western blot) | 第28-29页 |
| 3.2.8 重组耻垢分枝杆菌菌落形态观察 | 第29页 |
| 3.2.9 滑动实验 | 第29页 |
| 3.2.10 耻垢分枝杆菌生物膜培养 | 第29页 |
| 3.2.11 重组耻垢分枝杆菌脂肪酸分析 | 第29-30页 |
| 3.2.12 重组耻垢分枝杆菌在营养饥饿条件以及酸性条件下的存活影响 | 第30页 |
| 3.2.13 重组耻垢分枝杆菌对SDS耐受性检测 | 第30-31页 |
| 3.2.14 重组耻垢分枝杆菌对氧化压力的影响 | 第31页 |
| 3.2.15 重组耻垢分支杆菌侵染巨噬细胞(RAW264.7和THP-1)后胞内存活率及细胞因子检测 | 第31-36页 |
| 3.2.15.1 巨噬细胞培养 | 第31-32页 |
| 3.2.15.2 重组耻垢分枝杆菌菌悬液的制备 | 第32页 |
| 3.2.15.3 重组耻垢分枝杆菌感染巨噬细胞 | 第32页 |
| 3.2.15.4 重组耻垢分支杆菌感染巨噬细胞（RAW264.7和THP-1)后细胞因子检测 | 第32-36页 |
| 第4章 结果与分析 | 第36-48页 |
| 4.1 rv1515c目的基因扩增和鉴定 | 第36页 |
| 4.2 成功构建Rv1515c大肠杆菌表达菌株 | 第36-37页 |
| 4.3 Rv1515c重组蛋白在大肠杆菌BL21中成功表达 | 第37-38页 |
| 4.4 成功构建重组耻垢分枝杆菌MS_Rv1515c | 第38页 |
| 4.5 重组耻垢分枝杆菌MS_Rv1515c菌落形态观察和生物膜形成 | 第38-39页 |
| 4.6 Rv1515c对耻垢分枝杆菌生长无显著影响 | 第39-40页 |
| 4.7 滑动实验 | 第40页 |
| 4.8 重组耻垢分枝杆菌脂肪酸含量检测 | 第40-41页 |
| 4.9 Rv1515c增强耻垢分枝杆菌在营养饥饿及酸性条件下的存活 | 第41-42页 |
| 4.10 Rv1515c增强耻垢分枝杆菌对SDS的耐受 | 第42页 |
| 4.11 Rv1515c增强耻垢分枝杆菌对H_2O_2的耐受 | 第42-43页 |
| 4.12 Rv1515c增强耻垢分支杆菌对联氨的耐受 | 第43-44页 |
| 4.14 Rv1515c增强耻垢分枝杆菌在RAW264.7巨噬细胞中存活 | 第44页 |
| 4.15 Rv1515c引起RAW264.7巨噬细胞中细胞因子的变化 | 第44-45页 |
| 4.16 Rv1515c增强耻垢分枝杆菌在THP-1巨噬细胞中存活 | 第45-46页 |
| 4.17 Rv1515c引起THP-1巨噬细胞中细胞因子的变化 | 第46-48页 |
| 第5章 结论与展望 | 第48-52页 |
| 5.1 实验结论 | 第48页 |
| 5.2 讨论与分析 | 第48-50页 |
| 5.3 展望 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 在学期间所发表的文章 | 第60页 |
