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硒缺乏雏鸡肠粘膜差异蛋白的筛选验证及信号通路研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
英文缩略词表第12-14页
第一章 文献综述第14-30页
    1.1 微量元素硒的研究进展第14-21页
        1.1.1 硒的发现和它的功能第14-15页
        1.1.2 硒在机体内存在的形式第15-20页
        1.1.3 硒对机体的影响第20-21页
    1.2 肠道粘膜免疫的研究进展第21-25页
        1.2.1 非免疫肠粘膜屏障第21页
        1.2.2 雏鸡肠粘膜的免疫系统第21-22页
        1.2.3 免疫系统效应因子第22-24页
        1.2.4 肠道免疫的影响因素第24-25页
    1.3 硒与肠道粘膜免疫第25-27页
    1.4 研究的目的和意义第27-29页
    1.5 研究的技术路线第29-30页
第二章 硒缺乏雏鸡模型的建立第30-39页
    引言第30页
    2.1 材料与方法第30-33页
        2.1.1 试验试剂第30页
        2.1.2 试验仪器第30-31页
        2.1.3 试验日粮第31页
        2.1.4 试验动物第31-32页
        2.1.5 试验分组第32页
        2.1.6 饲料、血液和组织样品中硒含量的测定第32页
        2.1.7 肠道粘膜中SIg A含量的变化第32页
        2.1.8 雏鸡肠粘膜中GSH、GSSG和GPx水平的检测第32页
        2.1.9 组织病理学检查第32-33页
        2.1.10 统计学处理第33页
    2.2 结果第33-36页
        2.2.1 饲料硒含量的测定第33页
        2.2.2 血液与肠粘膜硒含量的测定第33-34页
        2.2.3 硒缺乏对雏鸡肠道SIg A分泌量的影响第34-35页
        2.2.4 雏鸡十二指肠粘膜中GSH、GSSG和GPx的水平第35页
        2.2.5 组织病理学分析第35-36页
    2.3 讨论第36-38页
    2.4 小结第38-39页
第三章 硒缺乏雏鸡十二指肠粘膜差异蛋白组的筛选第39-77页
    引言第39页
    3.1 材料与方法第39-46页
        3.1.1 主要试剂第39页
        3.1.2 试剂配制第39-40页
        3.1.3 主要仪器第40页
        3.1.4 样品制备第40-42页
        3.1.5 SCX分离第42-43页
        3.1.6 质谱分析第43页
        3.1.7 数据分析第43-45页
        3.1.8 生物信息学分析第45-46页
        3.1.9 统计学处理第46页
    3.2 结果第46-73页
        3.2.1 蛋白浓度测定结果第46页
        3.2.2 SDS-PAGE电泳第46-47页
        3.2.3 酶解肽段浓度测定第47页
        3.2.4 肽段SCX分级第47页
        3.2.5 定量比值直方分布分析第47-48页
        3.2.6 相关性分析第48页
        3.2.7 蛋白质鉴定结果第48-49页
        3.2.8 显著性差异蛋白质第49-53页
        3.2.9 生物信息学分析结果第53-73页
    3.3 讨论第73-75页
    3.4 小结第75-77页
第四章 硒缺乏雏鸡差异蛋白的验证及其通过NF-κB通路调控炎症基因的分析第77-91页
    引言第77页
    4.1 材料与方法第77-81页
        4.1.1 所需仪器设备第77页
        4.1.2 试验试剂第77-78页
        4.1.3 试剂配制第78页
        4.1.4 Western bolt检测肠粘膜组织中蛋白的表达第78-79页
        4.1.5 差异蛋白荧光定量PCR检测第79-80页
        4.1.6 雏鸡肠粘膜中p65、NF-κB p65 DNA结合、p-IκB和IκB活性的检测第80-81页
        4.1.7 雏鸡肠粘膜中炎性因子的检测第81页
        4.1.8 统计学方法第81页
    4.2 结果第81-86页
        4.2.1 Western bolt验证及蛋白功能第81-84页
        4.2.2 差异蛋白的实时荧光定量 PCR 分析第84-85页
        4.2.3 雏鸡肠粘膜中p65、NF-κB p65 DNA结合、p-IκB和IκB活性的检测第85页
        4.2.4 雏鸡肠粘膜中细胞因子浓度的检测第85-86页
    4.3 讨论第86-90页
        4.3.1 验证差异蛋白第86-88页
        4.3.2 验证候选基因第88页
        4.3.3 硒通过NF-κB信号通路调控炎症基因第88-90页
    4.4 小结第90-91页
第五章 全文结论第91-92页
参考文献第92-103页
致谢第103-104页
附图第104-108页
附表第108-150页
个人简介第150页

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