摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第13-26页 |
1.1 研究背景及意义 | 第13-14页 |
1.2 国内外研究进展及成果 | 第14-23页 |
1.2.1 生物蜡酯 | 第14-15页 |
1.2.2 生物蜡酯合成途径 | 第15-16页 |
1.2.3 蜡酯合酶WS | 第16-21页 |
1.2.4 白蜡虫WS | 第21-23页 |
1.3 研究目标与主要研究内容 | 第23-26页 |
1.3.1 关键的科学问题与研究目标 | 第23页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第23-24页 |
1.3.3 项目来源与经费支持 | 第24-25页 |
1.3.4 研究技术路线图 | 第25-26页 |
第二章 白蜡虫ws基因表达动态分析 | 第26-36页 |
2.1 试验材料与试剂设备 | 第26-27页 |
2.1.1 试验材料 | 第26-27页 |
2.1.2 试验试剂 | 第27页 |
2.1.3 仪器设备 | 第27页 |
2.2 试验方法 | 第27-30页 |
2.2.1 样品研磨与RNA提取 | 第27-29页 |
2.2.2 cDNA第一链模板的合成 | 第29页 |
2.2.3 cDNA模板的稀释 | 第29页 |
2.2.4 RT-qPCR | 第29-30页 |
2.3 结果与讨论 | 第30-36页 |
2.3.1 结果 | 第30-34页 |
2.3.2 讨论 | 第34-36页 |
第三章 白蜡虫泌蜡高峰期ws基因RNA干扰研究 | 第36-48页 |
3.1 试验材料与试剂设备 | 第36-37页 |
3.1.1 试验材料 | 第36-37页 |
3.1.2 试验试剂 | 第37页 |
3.1.3 仪器设备 | 第37页 |
3.2 试验方法 | 第37-44页 |
3.2.1 ws基因编码区的克隆 | 第37-41页 |
3.2.2 制备dsRNA转录模板 | 第41-42页 |
3.2.3 制备GFP对照转录模板 | 第42页 |
3.2.4 合成dsRNA | 第42-43页 |
3.2.5 dsRNA涂抹白蜡虫2龄雄幼虫 | 第43页 |
3.2.6 检测RNA干扰后白蜡虫ws基因表达量 | 第43-44页 |
3.3 结果 | 第44-46页 |
3.4 讨论 | 第46-48页 |
第四章 白蜡虫蜡酯合酶WS酶活检测 | 第48-64页 |
4.1 试验材料与试剂设备 | 第48-49页 |
4.1.1 试验材料 | 第48-49页 |
4.1.2 试验试剂 | 第49页 |
4.1.3 仪器设备 | 第49页 |
4.2 试验方法 | 第49-59页 |
4.2.1 含有Bam HI和Hand Ⅲ酶切位点ws基因编码区克隆 | 第49-52页 |
4.2.2 构建WS真核表达载体 | 第52-53页 |
4.2.3 获取重组病毒杆粒 | 第53-54页 |
4.2.4 WS在BmN昆虫细胞中的表达 | 第54-57页 |
4.2.5 WS酶活检测 | 第57-59页 |
4.3 结果与讨论 | 第59-64页 |
4.3.1 结果 | 第59-62页 |
4.3.2 讨论 | 第62-64页 |
第五章 总讨论与结论 | 第64-67页 |
5.1 总讨论 | 第64-65页 |
5.2 结论 | 第65页 |
5.3 不足与展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
在读期间的学术研究 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |