| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 综述 | 第13-25页 |
| 1.1 冷杉属植物概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 冷杉植物种类及地理分布 | 第13-15页 |
| 1.1.2 冷杉植物研究价值 | 第15页 |
| 1.1.3 冷杉属植物研究现状 | 第15-17页 |
| 1.2 百山祖冷杉研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.1 百山祖冷杉的形态特征 | 第17页 |
| 1.2.2 百山祖冷杉面临的问题 | 第17-19页 |
| 1.3 植物DNA分子标记技术 | 第19-24页 |
| 1.3.1 SRAP分子标记技术 | 第20-21页 |
| 1.3.2 ITS序列分析技术 | 第21-24页 |
| 1.4 研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 基于SRAP技术的百山祖冷杉遗传多样性研究 | 第25-45页 |
| 2.1 材料和方法 | 第25-29页 |
| 2.1.1 种间研究实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 种内研究实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.3 试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.2 SRAP引物筛选、反应体系、反应程序优化 | 第29-31页 |
| 2.2.3 数据处理与分析 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第32-42页 |
| 2.3.1 基因组浓度与纯度检测 | 第32-33页 |
| 2.3.2 SRAP-PCR对30个样品扩增 | 第33-34页 |
| 2.3.3 SRAP引物多态位点比率 | 第34-35页 |
| 2.3.4 SRAP遗传多样性指数 | 第35-38页 |
| 2.3.5 遗传相似系数 | 第38-40页 |
| 2.3.6 UPGMA聚类分析 | 第40-42页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第42-45页 |
| 2.4.1 影响冷杉SRAP-PCR扩增的因素 | 第42-43页 |
| 2.4.2 SRAP检测方法的独特性 | 第43页 |
| 2.4.3 百山祖冷杉的SRAP遗传多样性分析 | 第43-44页 |
| 2.4.4 百山祖冷杉聚类分析 | 第44-45页 |
| 第三章 基于ITS技术研究的百山祖冷杉遗传分析 | 第45-75页 |
| 3.1 材料 | 第45-48页 |
| 3.1.1 菌种、载体、引物 | 第45-46页 |
| 3.1.2 试剂 | 第46-47页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第47-48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 实验过程 | 第48-51页 |
| 3.2.3 数据处理与分析 | 第51页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第51-72页 |
| 3.3.1 冷杉DNA的提取 | 第51-52页 |
| 3.3.2 冷杉基因组DNA扩增 | 第52页 |
| 3.3.3 百山祖冷杉样品内ITS1-5.8S-ITS2同源一致性分析 | 第52-56页 |
| 3.3.4 百山祖冷杉样品间ITS1-5.8S-ITS2序列一致性分析 | 第56-60页 |
| 3.3.5 百山祖冷杉样品ITS1-5.8S-ITS2多重序列比对分析 | 第60-63页 |
| 3.3.6 百山祖冷杉ITS2序列结构分析 | 第63-65页 |
| 3.3.7 基于完整ITS序列的百山祖冷杉种系进化研究 | 第65-66页 |
| 3.3.8 进化距离 | 第66-69页 |
| 3.3.9 基于完整ITS序列结合ITS2结构系统进化分析 | 第69-72页 |
| 3.4 ITS序列分析小结 | 第72-75页 |
| 3.4.1 冷杉基因组提取 | 第72页 |
| 3.4.2 ITS-PCR扩增 | 第72页 |
| 3.4.3 ITS序列特征 | 第72-73页 |
| 3.4.4 ITS2区序列二级结构分析 | 第73页 |
| 3.4.5 亲缘关系分析 | 第73-75页 |
| 第四章 结论 | 第75-80页 |
| 4.1 总DNA的提取 | 第75页 |
| 4.2 研究方法的可行性 | 第75-76页 |
| 4.3 SRAP和ITS结果分析比较 | 第76-77页 |
| 4.4 百山祖冷杉的遗传保护 | 第77-80页 |
| 4.4.1 百山祖冷杉濒危的原因 | 第77-78页 |
| 4.4.2 百山祖冷杉的保护策略 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 附录 | 第88-96页 |
| 附录A 百山祖冷杉 | 第88-89页 |
| 附录B ITS2二级结构 | 第89-93页 |
| 附录C 附表 | 第93-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 在校期间成果及发表论文情况 | 第97页 |
