| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 综述 | 第11-26页 |
| 1.1 PRRSV简介 | 第11-12页 |
| 1.2 HP-PRRSV | 第12页 |
| 1.3 危害 | 第12-13页 |
| 1.4 理化特性和生物学特性 | 第13-15页 |
| 1.4.1 理化特性 | 第13-14页 |
| 1.4.2 生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.5 基因组结构 | 第15-16页 |
| 1.6 病毒基因的复制与转录 | 第16-18页 |
| 1.7 结构蛋白与非结构蛋白的功能与特性 | 第18-21页 |
| 1.7.1 非结构蛋白 | 第18-19页 |
| 1.7.2 结构蛋白 | 第19-21页 |
| 1.8 PRRSV疫苗 | 第21-23页 |
| 1.8.1 灭活苗 | 第21页 |
| 1.8.2 弱毒苗 | 第21页 |
| 1.8.3 新型疫苗(亚单位疫苗、DNA疫苗、活载体疫苗) | 第21-23页 |
| 1.9 生物安全措施 | 第23-25页 |
| 1.9.1 猪场外部生物安全措施 | 第23页 |
| 1.9.2 猪场内部生物安全措施 | 第23-24页 |
| 1.9.3 其他生物安全措施 | 第24-25页 |
| 1.10 本研究的目的和意义 | 第25页 |
| 1.11 本研究的实验技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 在ORF7和3'UTR之间表达外源基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建、拯救及外源基因的表达 | 第26-53页 |
| 2.1 材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂耗材 | 第26-27页 |
| 2.1.3 相关试剂的配置 | 第27-28页 |
| 2.1.4 细胞 | 第28页 |
| 2.1.5 质粒 | 第28页 |
| 2.1.6 引物设计与合成 | 第28-29页 |
| 2.1.7 分子生物学相关软件 | 第29页 |
| 2.2 方法 | 第29-41页 |
| 2.2.1 重组PRRSV感染性克隆的构建 | 第29-35页 |
| 2.2.2 重组PRRSV感染性克隆拯救、传代 | 第35-39页 |
| 2.2.2.1 重组质粒转染BHK-21细胞 | 第35-36页 |
| 2.2.2.2 体外传代 | 第36页 |
| 2.2.2.3 重组病毒的RT-PCR和测序鉴定 | 第36-39页 |
| 2.2.3 重组拯救病毒的CPE | 第39页 |
| 2.2.4 重组拯救病毒的P3代TCID50 | 第39页 |
| 2.2.5 重组拯救病毒的遗传稳定性 | 第39页 |
| 2.2.6 重组拯救病毒的间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA) | 第39-40页 |
| 2.2.7 重组拯救病毒的多步生长曲线试验 | 第40-41页 |
| 2.3 结果 | 第41-50页 |
| 2.3.1 重组PRRSV感染性克隆的构建 | 第41-42页 |
| 2.3.2 重组PRRSV感染性克隆拯救 | 第42-45页 |
| 2.3.3 重组拯救病毒的CPE | 第45-47页 |
| 2.3.4 重组拯救病毒的P3代TCID_(50) | 第47-48页 |
| 2.3.5 重组拯救病毒的遗传稳定性 | 第48页 |
| 2.3.6 重组拯救病毒的间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA) | 第48-49页 |
| 2.3.7 重组拯救病毒的多步生长曲线试验 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第67页 |
