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细胞表面新型微囊泡的分离及其特性研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第1章 引言第8-18页
    1.1 细胞表面微囊泡的由来第8页
    1.2 微颗粒第8-13页
        1.2.1 微颗粒的特性第9页
        1.2.2 微颗粒的形成第9-10页
        1.2.3 外界刺激与微颗粒的形成第10-11页
        1.2.4 微颗粒研究的状况第11-12页
        1.2.5 微颗粒的研究方法第12-13页
        1.2.6 微颗粒与疾病的关系第13页
    1.3 微颗粒与细胞表面微囊泡的纠缠第13-14页
    1.4 多泡小体与细胞表面微囊泡第14-15页
        1.4.1 多泡小体第14-15页
        1.4.2 多泡小体与细胞表面微囊泡的纠缠第15页
    1.5 凋亡小体与细胞表面微囊泡的纠缠第15-16页
    1.6 线粒体与细胞表面微囊泡的纠缠第16-17页
    1.7 小结第17-18页
第2章 实验材料与方法第18-25页
    2.1 细胞第18页
    2.2 主要仪器第18-19页
    2.3 主要试剂第19页
    2.4 试剂及其配制方法第19-20页
    2.5 实验方法第20-25页
        2.5.1 细胞的传代培养以及冻存复苏第20-21页
        2.5.2 氯仿甲醇处理对HUVEC和HepG-2 细胞表面微囊泡的影响第21页
        2.5.3 Triton X-100处理HUVEC和HepG-2 后氯仿甲醇溶解微囊泡第21页
        2.5.4 乙醇梯度脱水观察细胞表面微囊泡第21页
        2.5.5 细胞固定后水环境中空气干燥对微囊泡的影响第21页
        2.5.6 动态观察各种去污剂处理HUVEC和HepG-2第21页
        2.5.7 线粒体活染及其动态观察第21-22页
        2.5.8 TNF-α 及LPS刺激HUVEC后PS染色第22页
        2.5.9 TNF-α 刺激对细胞表面微囊泡数目变化的影响第22页
        2.5.10 SBYR green I染色第22页
        2.5.11 CD63、CD107α 和caveolin-1 免疫荧光染色第22-23页
        2.5.12 GM1及HepG-2 GM3免疫染色第23页
        2.5.13 EMP标志物CD31和CD146免疫荧光染色第23页
        2.5.14 FAK染色第23页
        2.5.15 扫描电镜观察细胞表面微囊泡第23-24页
        2.5.16 HUVEC细胞表面微囊泡的分离第24页
        2.5.17 透射电子显微镜观察细胞表面微囊泡第24-25页
第3章 实验结果第25-47页
    3.1 水环境中空气干燥微囊泡会对应形成外面呈圆形的向内凹陷第25-26页
    3.2 微囊泡对氯仿甲醇处理的敏感性第26-28页
    3.3 锇酸未固定时乙醇梯度脱水引起的细胞表面微囊泡的转变第28-29页
    3.4 锇酸固定可以较好地保留细胞表面微囊泡第29-30页
    3.5 线粒体与微囊泡的非对应性第30-32页
    3.6 多泡小体和溶酶体与细胞表面微囊泡的非对应性第32-34页
    3.7 细胞表面微囊泡与凋亡小体的非对应性第34-35页
    3.8 FAK与细胞表面微囊泡的共定位研究第35-36页
    3.9 小窝蛋白-1 并非细胞表面微囊泡所特有第36-37页
    3.10 脂筏与细胞表面微囊泡的关系第37-38页
    3.11 TNF-α 刺激对细胞表面微囊泡数目的影响第38-39页
    3.12 PS外化与细胞表面微囊泡关系第39-40页
    3.13 EMP的标志物CD31和CD146不存在于细胞表面微囊泡上第40-42页
    3.14 细胞表面微囊泡对不同去垢剂及其浓度的耐受性第42-46页
    3.15 扫描电镜观察细胞表面微囊泡第46页
    3.16 细胞表面微囊泡的分离及透射电镜观察第46-47页
第4章 讨论第47-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-56页
附表第56页

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