摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
主要缩略词总汇 | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-18页 |
1.1 ZEA的简介 | 第9-10页 |
1.1.1 ZEA的来源及分布 | 第9页 |
1.1.2 ZEA的污染情况及限量标准 | 第9-10页 |
1.1.3 ZEA的吸收代谢和毒性作用 | 第10页 |
1.2 真菌毒素的减毒方法 | 第10-12页 |
1.2.1 化学、物理及生物脱毒法 | 第10-11页 |
1.2.2 抗真菌毒素的营养学方法 | 第11-12页 |
1.3 RSV的简介 | 第12-14页 |
1.3.1 RSV的来源和理化性质 | 第12页 |
1.3.2 RSV的生物利用率及血浆中水平 | 第12-13页 |
1.3.3 RSV的生物学作用与抗氧化特征 | 第13-14页 |
1.4 SIRT1与细胞功能调节 | 第14-16页 |
1.4.1 SIRT1与氧化应激及还原修饰 | 第15页 |
1.4.2 SIRT1与能量代谢 | 第15页 |
1.4.3 SIRT1与炎症调节 | 第15-16页 |
1.4.4 SIRT1与细胞凋亡 | 第16页 |
1.4.5 SIRT1与细胞增殖和衰老 | 第16页 |
1.5 立题背景与意义 | 第16-17页 |
1.6 主要研究内容 | 第17-18页 |
第二章 RSV对ZEA致HEK293细胞存活率及氧化损伤的保护作用 | 第18-27页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 材料与仪器 | 第18-19页 |
2.2.1 主要实验材料与试剂 | 第18页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.3 实验方法 | 第19-22页 |
2.3.1 主要试剂的配制 | 第19页 |
2.3.2 细胞的复苏与传代培养 | 第19-20页 |
2.3.3 CCK-8 法测定细胞增殖抑制率 | 第20页 |
2.3.4 细胞存活率的测定 | 第20页 |
2.3.5 细胞分组及处理方式 | 第20-21页 |
2.3.6 细胞内ROS水平的测定 | 第21页 |
2.3.7 细胞内氧化还原状态的测定 | 第21页 |
2.3.8 数据分析 | 第21-22页 |
2.4 实验结果与分析 | 第22-25页 |
2.4.1 ZEA对HEK293细胞的半数抑制浓度(IC50)及RSV/LA对HEK293细胞的无损害作用浓度 | 第22-23页 |
2.4.2 RSV/LA预处理对细胞存活率的影响 | 第23页 |
2.4.3 RSV/LA预处理对细胞内ROS水平的影响 | 第23-24页 |
2.4.4 RSV/LA预处理对细胞内MDA含量的影响 | 第24-25页 |
2.4.5 RSV/LA预处理对细胞内SOD和Mn-SOD活性的影响 | 第25页 |
2.5 小结与讨论 | 第25-27页 |
第三章 RSV对ZEA致HEK293细胞凋亡的保护作用 | 第27-35页 |
3.1 引言 | 第27-28页 |
3.2 材料与仪器 | 第28页 |
3.2.1 主要实验材料与试剂 | 第28页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第28页 |
3.3 实验方法 | 第28-30页 |
3.3.1 主要试剂的配制 | 第28页 |
3.3.2 细胞的复苏与培养 | 第28页 |
3.3.3 细胞分组与处理方式 | 第28页 |
3.3.4 AO染色检测细胞核形态变化 | 第28-29页 |
3.3.5 JC-1 检测细胞中线粒体膜电位的变化 | 第29页 |
3.3.6 细胞周期的检测 | 第29页 |
3.3.7 Annexin V与FITC检测细胞凋亡率 | 第29-30页 |
3.3.8 数据分析 | 第30页 |
3.4 实验结果与分析 | 第30-33页 |
3.4.1 RSV预处理对ZEA引起的HEK293细胞核形态改变的影响 | 第30页 |
3.4.2 RSV预处理对ZEA引起的HEK293线粒体膜电位变化的影响 | 第30-31页 |
3.4.3 RSV预处理对ZEA引起的HEK293细胞周期变化的影响 | 第31-32页 |
3.4.4 RSV预处理对ZEA引起的HEK293细胞凋亡率的变化的影响 | 第32-33页 |
3.5 小结与讨论 | 第33-35页 |
第四章 RSV对ZEA致HEK293细胞损伤的保护作用机制 | 第35-44页 |
4.1 引言 | 第35页 |
4.2 材料与仪器 | 第35-36页 |
4.2.1 主要实验材料与试剂 | 第35-36页 |
4.2.2 主要仪器设备 | 第36页 |
4.3 实验方法 | 第36-39页 |
4.3.1 细胞的复苏与培养 | 第36页 |
4.3.2 细胞分组及处理方式 | 第36页 |
4.3.3 RNA的提取与反转录 | 第36-37页 |
4.3.4 实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达量 | 第37页 |
4.3.5 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)结合免疫印迹(Western Blot)检测FOXO3a蛋白的乙酰化 | 第37-39页 |
4.3.6 数据分析 | 第39页 |
4.4 实验结果与分析 | 第39-42页 |
4.4.1 药物处理对HEK293细胞中SIRT1基因mRNA表达的影响 | 第39-40页 |
4.4.2 药物处理对HEK283细胞中Bcl-2/Bax mRNA表达的影响 | 第40-41页 |
4.4.3 药物处理对HEK283细胞中FOXO3a乙酰化水平的影响 | 第41-42页 |
4.5 小结与讨论 | 第42-44页 |
主要结论与展望 | 第44-46页 |
结论 | 第44页 |
展望 | 第44-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |