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Hoxa5对脂肪细胞增殖与凋亡的调节作用及其分子机制研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
文献综述第13-27页
    第一章 Hox家族概述第13-19页
        1.1 Hox家族的发现与结构特点第13-14页
        1.2 Hox家族的功能研究第14-17页
            1.2.1 Hox与细胞增殖和分化第14-15页
            1.2.2 Hox与细胞凋亡第15-16页
            1.2.3 Hox与脂肪发育第16-17页
        1.3 Hox的表达调控与其转录调控的下游靶基因第17-19页
    第二章 细胞增殖研究进展第19-22页
        2.1 细胞增殖概述第19-20页
        2.2 细胞增殖的调控第20-22页
    第三章 细胞凋亡研究进展第22-27页
        3.1 细胞凋亡的形态学变化第22-23页
        3.2 细胞凋亡的经典途径第23-25页
            3.2.1 细胞凋亡的线粒体途径第23-24页
            3.2.2 细胞凋亡的死亡受体途径第24-25页
        3.3 Hoxa5与细胞凋亡第25-27页
试验研究第27-65页
    前言第27-28页
    第四章 Hoxa5对脂肪细胞增殖的影响第28-40页
        4.1 材料第28-29页
            4.1.1 细胞第28页
            4.1.2 主要试剂第28-29页
            4.1.3 设备仪器第29页
        4.2 方法第29-32页
            4.2.1 细胞培养第29页
            4.2.2 质粒载体提取第29页
            4.2.3 质粒载体转染脂肪细胞第29-30页
            4.2.4 细胞计数(CCK-8 法)第30页
            4.2.5 EdU细胞周期检测第30页
            4.2.6 细胞周期流式细胞术分析第30页
            4.2.7 细胞总RNA提取第30页
            4.2.8 反转录及实时定量PCR第30-31页
            4.2.9 细胞总蛋白提取第31页
            4.2.10 Western Blot检测第31-32页
            4.2.11 数据统计及分析第32页
        4.3 结果与分析第32-37页
            4.3.1 Hoxa5超表达效率检测及干扰载体筛选第32-33页
            4.3.2 Hoxa5对脂肪细胞细胞数量的影响第33页
            4.3.3 Hoxa5对脂肪细胞细胞周期的影响第33-35页
            4.3.4 Hoxa5对脂肪细胞增殖相关基因表达的影响第35-36页
            4.3.5 Hoxa5对脂肪细胞增殖相关信号通路的影响第36-37页
        4.4 讨论第37-39页
        4.5 小结第39-40页
    第五章 Hoxa5对脂肪细胞凋亡的影响第40-54页
        5.1 材料第41页
            5.1.1 细胞第41页
            5.1.2 主要试剂第41页
            5.1.3 仪器设备第41页
        5.2 方法第41-43页
            5.2.1 细胞培养第41页
            5.2.2 质粒载体提取第41页
            5.2.3 质粒载体转染脂肪细胞第41页
            5.2.4 线粒体膜电位检测(JC-1 荧光探针法)第41-42页
            5.2.6 细胞凋亡检测(Hoechst 33258 法)第42页
            5.2.7 细胞凋亡检测(Annexin V-FITC/PI双染色法)第42页
            5.2.8 细胞总RNA提取第42页
            5.2.9 反转录及实时定量PCR第42页
            5.2.10 细胞总蛋白提取第42页
            5.2.11 Western Blot检测第42-43页
            5.2.12 数据统计及分析第43页
        5.3 结果与分析第43-51页
            5.3.1 Hoxa5调节脂肪细胞凋亡的形态学观察第43页
            5.3.2 Hoxa5对脂肪细胞线粒体膜电位及细胞色素C的影响第43-44页
            5.3.3 Hoxa5对脂肪细胞凋亡相关基因表达的影响第44-45页
            5.3.4 Hoxa5对脂肪细胞不同阶段细胞凋亡的影响第45-46页
            5.3.5 Hoxa5对脂肪细胞基因组DNA片段化程度的影响第46-47页
            5.3.6 Hoxa5对棕榈酸诱导的脂肪细胞凋亡的影响第47-48页
            5.3.7 Hoxa5对血清饥饿诱导的脂肪细胞凋亡的影响第48-51页
        5.4 讨论第51-53页
        5.5 小结第53-54页
    第六章 Hoxa5通过转录调控调节脂肪细胞增殖与凋亡第54-64页
        6.1 材料第54-55页
            6.1.1 实验动物、菌株、质粒及细胞株第54页
            6.1.2 主要试剂和设备仪器第54-55页
        6.2 方法第55-57页
            6.2.1 小鼠基因组DNA提取第55页
            6.2.2 PCR扩增第55-56页
            6.2.3 胶回收第56页
            6.2.4 双酶切鉴定及T4连接第56页
            6.2.5 质粒载体提取第56页
            6.2.6 感受态细胞的制备质粒转化第56页
            6.2.7 细胞培养第56-57页
            6.2.8 质粒载体转染第57页
            6.2.9 双荧光素酶活性检测第57页
            6.2.10 数据统计与分析第57页
        6.3 结果与分析第57-62页
            6.3.1 Hoxa5对Ccne1的转录调控作用第57-60页
            6.3.2 Hoxa5对Bax的转录调控作用第60-62页
        6.4 讨论第62-63页
        6.5 小结第63-64页
    第七章 结论、创新点以及进一步研究内容第64-65页
        7.1 结论第64页
        7.2 创新点第64页
        7.3 进一步研究内容第64-65页
参考文献第65-69页
附录第69-73页
致谢第73-74页
作者简介第74页

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