摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
文献综述 | 第13-27页 |
第一章 Hox家族概述 | 第13-19页 |
1.1 Hox家族的发现与结构特点 | 第13-14页 |
1.2 Hox家族的功能研究 | 第14-17页 |
1.2.1 Hox与细胞增殖和分化 | 第14-15页 |
1.2.2 Hox与细胞凋亡 | 第15-16页 |
1.2.3 Hox与脂肪发育 | 第16-17页 |
1.3 Hox的表达调控与其转录调控的下游靶基因 | 第17-19页 |
第二章 细胞增殖研究进展 | 第19-22页 |
2.1 细胞增殖概述 | 第19-20页 |
2.2 细胞增殖的调控 | 第20-22页 |
第三章 细胞凋亡研究进展 | 第22-27页 |
3.1 细胞凋亡的形态学变化 | 第22-23页 |
3.2 细胞凋亡的经典途径 | 第23-25页 |
3.2.1 细胞凋亡的线粒体途径 | 第23-24页 |
3.2.2 细胞凋亡的死亡受体途径 | 第24-25页 |
3.3 Hoxa5与细胞凋亡 | 第25-27页 |
试验研究 | 第27-65页 |
前言 | 第27-28页 |
第四章 Hoxa5对脂肪细胞增殖的影响 | 第28-40页 |
4.1 材料 | 第28-29页 |
4.1.1 细胞 | 第28页 |
4.1.2 主要试剂 | 第28-29页 |
4.1.3 设备仪器 | 第29页 |
4.2 方法 | 第29-32页 |
4.2.1 细胞培养 | 第29页 |
4.2.2 质粒载体提取 | 第29页 |
4.2.3 质粒载体转染脂肪细胞 | 第29-30页 |
4.2.4 细胞计数(CCK-8 法) | 第30页 |
4.2.5 EdU细胞周期检测 | 第30页 |
4.2.6 细胞周期流式细胞术分析 | 第30页 |
4.2.7 细胞总RNA提取 | 第30页 |
4.2.8 反转录及实时定量PCR | 第30-31页 |
4.2.9 细胞总蛋白提取 | 第31页 |
4.2.10 Western Blot检测 | 第31-32页 |
4.2.11 数据统计及分析 | 第32页 |
4.3 结果与分析 | 第32-37页 |
4.3.1 Hoxa5超表达效率检测及干扰载体筛选 | 第32-33页 |
4.3.2 Hoxa5对脂肪细胞细胞数量的影响 | 第33页 |
4.3.3 Hoxa5对脂肪细胞细胞周期的影响 | 第33-35页 |
4.3.4 Hoxa5对脂肪细胞增殖相关基因表达的影响 | 第35-36页 |
4.3.5 Hoxa5对脂肪细胞增殖相关信号通路的影响 | 第36-37页 |
4.4 讨论 | 第37-39页 |
4.5 小结 | 第39-40页 |
第五章 Hoxa5对脂肪细胞凋亡的影响 | 第40-54页 |
5.1 材料 | 第41页 |
5.1.1 细胞 | 第41页 |
5.1.2 主要试剂 | 第41页 |
5.1.3 仪器设备 | 第41页 |
5.2 方法 | 第41-43页 |
5.2.1 细胞培养 | 第41页 |
5.2.2 质粒载体提取 | 第41页 |
5.2.3 质粒载体转染脂肪细胞 | 第41页 |
5.2.4 线粒体膜电位检测(JC-1 荧光探针法) | 第41-42页 |
5.2.6 细胞凋亡检测(Hoechst 33258 法) | 第42页 |
5.2.7 细胞凋亡检测(Annexin V-FITC/PI双染色法) | 第42页 |
5.2.8 细胞总RNA提取 | 第42页 |
5.2.9 反转录及实时定量PCR | 第42页 |
5.2.10 细胞总蛋白提取 | 第42页 |
5.2.11 Western Blot检测 | 第42-43页 |
5.2.12 数据统计及分析 | 第43页 |
5.3 结果与分析 | 第43-51页 |
5.3.1 Hoxa5调节脂肪细胞凋亡的形态学观察 | 第43页 |
5.3.2 Hoxa5对脂肪细胞线粒体膜电位及细胞色素C的影响 | 第43-44页 |
5.3.3 Hoxa5对脂肪细胞凋亡相关基因表达的影响 | 第44-45页 |
5.3.4 Hoxa5对脂肪细胞不同阶段细胞凋亡的影响 | 第45-46页 |
5.3.5 Hoxa5对脂肪细胞基因组DNA片段化程度的影响 | 第46-47页 |
5.3.6 Hoxa5对棕榈酸诱导的脂肪细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
5.3.7 Hoxa5对血清饥饿诱导的脂肪细胞凋亡的影响 | 第48-51页 |
5.4 讨论 | 第51-53页 |
5.5 小结 | 第53-54页 |
第六章 Hoxa5通过转录调控调节脂肪细胞增殖与凋亡 | 第54-64页 |
6.1 材料 | 第54-55页 |
6.1.1 实验动物、菌株、质粒及细胞株 | 第54页 |
6.1.2 主要试剂和设备仪器 | 第54-55页 |
6.2 方法 | 第55-57页 |
6.2.1 小鼠基因组DNA提取 | 第55页 |
6.2.2 PCR扩增 | 第55-56页 |
6.2.3 胶回收 | 第56页 |
6.2.4 双酶切鉴定及T4连接 | 第56页 |
6.2.5 质粒载体提取 | 第56页 |
6.2.6 感受态细胞的制备质粒转化 | 第56页 |
6.2.7 细胞培养 | 第56-57页 |
6.2.8 质粒载体转染 | 第57页 |
6.2.9 双荧光素酶活性检测 | 第57页 |
6.2.10 数据统计与分析 | 第57页 |
6.3 结果与分析 | 第57-62页 |
6.3.1 Hoxa5对Ccne1的转录调控作用 | 第57-60页 |
6.3.2 Hoxa5对Bax的转录调控作用 | 第60-62页 |
6.4 讨论 | 第62-63页 |
6.5 小结 | 第63-64页 |
第七章 结论、创新点以及进一步研究内容 | 第64-65页 |
7.1 结论 | 第64页 |
7.2 创新点 | 第64页 |
7.3 进一步研究内容 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
附录 | 第69-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简介 | 第74页 |