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基于Tsc1甲基化调控mTORC1及下游关键因子的电针治疗单纯性肥胖大鼠机制研究

中文摘要第2-5页
ABSTRACT第5-8页
中英文缩略词表第9-13页
引言第13-15页
实验研究第15-46页
    1 实验材料第15-22页
        1.1 实验动物第15页
        1.2 主要试剂及药品第15-18页
        1.3 溶液配制第18-20页
        1.4 主要仪器第20-22页
    2 实验方法第22-36页
        2.1 技术路线第22页
        2.2 动物分组第22-23页
        2.3 动物处理第23-24页
            2.3.1 DIO大鼠模型建立第23-24页
            2.3.2 模型成功的评估第24页
            2.3.3 分组处理第24页
        2.4 针剌治疗第24-25页
            2.4.1 针刺准备第24页
            2.4.2 穴位选取第24-25页
            2.4.3 针剌操作第25页
        2.5 组织取材第25-26页
        2.6 指标观察及检测方法第26-36页
            2.6.1 大鼠一般情况第26页
            2.6.2 大鼠体重、体脂及体脂率第26-27页
            2.6.3 用免疫组化染色SP法,平均光密度测定大鼠脑组织Dnmt2、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白表达第27-28页
            2.6.4 Western Blot测定大鼠脑组织mTORC1蛋白表达第28-30页
            2.6.5 实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定mTORC1,NPY,PoMC,AgRP mRNA表达第30-32页
            2.6.6 实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定Tsc1 DNA甲基化表达第32-36页
        2.7 统计方法第36页
    3 实验结果第36-46页
        3.1 大鼠一般情况第36-37页
        3.2 针剌对肥胖大鼠体重、体脂和体脂率的影响第37-38页
        3.3 各组大鼠下丘脑Tsc1基因DNA甲基化结果第38-39页
        3.4 各组大鼠下丘脑Dnmt2、Dnmt3a、Dnmt3b检测结果第39-42页
            3.4.1 各组大鼠下丘脑Dnmt2表达变化第39-40页
            3.4.2 各组大鼠下丘脑Dnmt3a表达变化第40-41页
            3.4.3 各组大鼠下丘脑Dnmt3b表达变化第41-42页
        3.5 各组大鼠下丘脑mTORC1检测结果第42-43页
            3.5.1 各组大鼠下丘脑mTORC1基因mRNA、蛋白表达变化第42-43页
        3.6 各组大鼠下丘脑PoMC、NPY、AgRP mRNA表达第43-46页
讨论第46-69页
    1 中医学对肥胖的认识第46-49页
        1.1 肥胖病名第46-47页
        1.2 病因第47-48页
        1.3 病机第48-49页
    2 西医学对肥胖的认识第49-54页
        2.1 肥胖的定义分型与诊断第49页
        2.2 对病因与发病机制的认识第49-51页
        2.3 对肥胖症的治疗第51-54页
    3 肥胖的针灸治疗第54-56页
        3.1 针灸治疗肥胖的疗效及优势第54页
        3.2 肥胖的针灸选穴第54-55页
        3.3 肥胖的刺灸方法第55页
        3.4 针灸治疗肥胖的作用机理探讨第55-56页
            3.4.1 祖国医学对肥胖作用机理的认识第55页
            3.4.2 现代医学对肥胖作用机理的认识第55-56页
    4 关于本实验研究方案的确定第56-61页
        4.1 本实验动物模型的建立与评估第56-58页
        4.2 本实验针灸处方的确定第58-59页
            4.2.1 穴位的选择第58-59页
            4.2.2 电针刺激波形的选择第59页
        4.3 本实验指标检测方法的确定第59-61页
            4.3.1 免疫组织化学染色SP法、平均光密度测定脑组织Dnmt2、Dnmt3a和Dnmt3b蛋白表达第59-60页
            4.3.2 用Western Blot测定脑组织mTORC1基因的蛋白表达第60-61页
            4.3.3 用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定脑组织mTORC1、NPY、AgRP和PoMC mRNA及Tsc1甲基化的表达第61页
    5 关于本实验研究结果的讨论第61-69页
        5.1 针刺对肥胖大鼠Tsc1基因DNA甲基化影响的研究第61-64页
            5.1.1 基于Tsc1基因DNA甲基化的表观遗传与肥胖第61-63页
            5.1.2 本实验中针刺对下丘脑Dnmts和Tsc1甲基化的影响第63-64页
        5.2 针刺对肥胖大鼠下丘脑mTORC1及下游关键因子的影响第64-69页
            5.2.1 下丘脑mTORC1信号通路与肥胖第64-67页
            5.2.2 本实验中针剌对下丘脑mTORC1、NPY、AgRP、POMC表达的影响第67-69页
结论第69-70页
问题与展望第70-71页
致谢第71-72页
参考文献第72-80页
附件第80-91页
    附件一 附图第80-84页
        1 针刺治疗过程第80-81页
        2 扩增曲线和溶解曲线图第81-84页
    附件二 综述 针刺治疗肥胖与DNA甲基化第84-90页
        参考文献第87-90页
    附件三 在读期间公开发表的论著及取得的科研成果第90-91页

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