| 摘要 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-14页 |
| 1.1 TGF-β信号通路研究进展 | 第8-12页 |
| 1.1.1 TGF-β信号通路结构组成 | 第8-10页 |
| 1.1.2 TGF-β信号通路重要的生理功能 | 第10-12页 |
| 1.2 免疫豁免研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 小鼠睾丸支持细胞研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3.1 睾丸支持细胞的发现 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-18页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第14-17页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-29页 |
| 2.2.1 构建真核表达载体 | 第18-21页 |
| 2.2.2 支持细胞分离与培养 | 第21-22页 |
| 2.2.3 真核表达载体转染支持细胞的鉴定实验 | 第22-27页 |
| 2.2.4 氟化钠对TGF-β信号通路的影响实验 | 第27-29页 |
| 3 实验结果 | 第29-37页 |
| 3.1 构建真核表达载体 | 第29-31页 |
| 3.1.1 小鼠pcDNA3.1-TGF-β1重组载体的构建 | 第29页 |
| 3.1.2 重组载体测序结果 | 第29-31页 |
| 3.2 支持细胞的分离与培养 | 第31-32页 |
| 3.2.1 细胞形态学观察 | 第31页 |
| 3.2.2 支持细胞姬姆萨染色结果 | 第31-32页 |
| 3.2.3 GATA4免疫荧光和免疫组化染色结果 | 第32页 |
| 3.3 真核表达载体转染支持细胞的鉴定 | 第32-34页 |
| 3.3.1 qRT-PCR检测支持细胞中TGF-β1过表达情况 | 第32-34页 |
| 3.3.2 蛋白水平的检测TGF-β_1的表达情况 | 第34页 |
| 3.4 氟化钠对TGF-β信号通路的影响 | 第34-37页 |
| 3.4.2 荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达结果 | 第35-36页 |
| 3.4.3 相关免疫因子含量变化情况 | 第36-37页 |
| 4 分析与讨论 | 第37-41页 |
| 4.1 构建真核表达载体 | 第37页 |
| 4.1.1 酶切位点的正确选择 | 第37页 |
| 4.1.2 目的片段中引入Kozak序列的目的 | 第37页 |
| 4.2 支持细胞分离与培养 | 第37-39页 |
| 4.2.1 小鼠睾丸支持细胞的体外培养与细胞传代 | 第38页 |
| 4.2.2 小鼠支持细胞的生物学鉴定方法 | 第38-39页 |
| 4.3 真核表达载体转染支持细胞的鉴定 | 第39页 |
| 4.4 氟化钠对TGF-β信号通路的影响实验 | 第39-41页 |
| 4.4.1 检测IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β_1的原因 | 第39-40页 |
| 4.4.2 Smad7蛋白表达下调的解释 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 5.1 构建真核表达载体 | 第41页 |
| 5.2 支持细胞的分离与培养 | 第41页 |
| 5.3 真核表达载体转染支持细胞的鉴定 | 第41页 |
| 5.4 氟化钠对TGF-β信号通路的影响实验 | 第41-42页 |
| 全文结论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| Abstract | 第48-49页 |
| 致谢 | 第50页 |
