摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 去势的定义和国内外研究 | 第12-13页 |
1.1.1 去势的定义和方法 | 第12页 |
1.1.2 去势的国内外研究现状 | 第12-13页 |
1.2 去势对主要组织器官的影响 | 第13-16页 |
1.2.1 去势对心脏的影响 | 第13-14页 |
1.2.2 去势对肝脏的影响 | 第14页 |
1.2.3 去势对脾的影响 | 第14页 |
1.2.4 去势对肺的影响 | 第14-15页 |
1.2.5 去势对肾的影响 | 第15页 |
1.2.6 去势对肌肉的影响 | 第15页 |
1.2.7 去势对脂肪的影响 | 第15-16页 |
1.3 昆明小鼠 | 第16页 |
1.4 转录组测序(RNA-seq) | 第16-22页 |
1.4.1 RNA-seq定义 | 第16-17页 |
1.4.2 RNA-seq原理 | 第17页 |
1.4.3 RNA-seq技术平台 | 第17-18页 |
1.4.4 RNA-seq技术优势 | 第18-19页 |
1.4.5 RNA-seq技术的应用 | 第19-22页 |
2 研究的目的意义 | 第22页 |
3 材料与方法 | 第22-36页 |
3.1 实验主要仪器和试剂 | 第22-23页 |
3.1.1 主要仪器设备 | 第22-23页 |
3.1.2 主要试剂 | 第23页 |
3.2 主要试验方法 | 第23-36页 |
3.2.1 小鼠去势模型的构建及饲养 | 第23页 |
3.2.2 小鼠体重指标的测定 | 第23页 |
3.2.3 小鼠屠宰指标的测定和样品采集 | 第23-24页 |
3.2.4 石蜡切片的制作和HE染色 | 第24页 |
3.2.5 总RNA的提取 | 第24-25页 |
3.2.6 总RNA的质检 | 第25-26页 |
3.2.7 RNA-seq测序 | 第26-31页 |
3.2.8 数据分析 | 第31-35页 |
3.2.9 RNA-seq数据可靠性验证 | 第35-36页 |
3.2.10 基因与表型性状的相关性分析 | 第36页 |
4 结果和分析 | 第36-61页 |
4.1 去势模型的建立 | 第36-37页 |
4.2 早期去势对小鼠长期的表型影响 | 第37-39页 |
4.2.1 体重指标的影响 | 第37页 |
4.2.2 屠宰指标的影响 | 第37-38页 |
4.2.3 组织形态学的影响 | 第38-39页 |
4.3 不同处理间多组织转录组测序文库的构建 | 第39-44页 |
4.3.1 总RNA甲醛变性琼脂糖凝胶检测结果 | 第39-41页 |
4.3.2 总RNA毛细管电泳检测结果 | 第41-42页 |
4.3.3 cDNA文库目的片段检测结果 | 第42-43页 |
4.3.4 cDNA目的片段文库PCR扩增后的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第43-44页 |
4.4 27个样品测序数据概述及数据质量评估 | 第44-49页 |
4.4.1 测序数据概述 | 第44-45页 |
4.4.2 测序数据质量评估 | 第45-49页 |
4.5 总体基因表达谱分析 | 第49-50页 |
4.6 假去势和双去势小鼠心、肝和骨骼肌转录组差异分析 | 第50-51页 |
4.7 假去势和双去势小鼠心、肝和骨骼肌差异转录本功能分析 | 第51-57页 |
4.7.1 早期极端去势对成年小鼠心脏形态学影响 | 第52-54页 |
4.7.2 早期极端去势对成年小鼠肝脏能量代谢的影响 | 第54-56页 |
4.7.3 早期极端去势对成年小鼠骨骼肌形态和迁移的影响 | 第56-57页 |
4.8 共表达基因模型与表型性状的相关性分析 | 第57-61页 |
5 讨论 | 第61-65页 |
5.1 小鼠为动物模型 | 第61页 |
5.2 去势模型的建立 | 第61页 |
5.3 早期去势对成年小鼠的表型影响 | 第61-62页 |
5.4 早期去势对成年小鼠不同组织转录组的总体影响 | 第62页 |
5.5 早期去势对成年小鼠不同组织转录组的差异影响 | 第62-65页 |
5.6 共表达基因模型与表型性状的关系 | 第65页 |
6 结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-72页 |
附录一 | 第72-74页 |
附录二 | 第74-76页 |
附录三 | 第76-79页 |
附录四 | 第79-84页 |
附录五 | 第84-88页 |
致谢 | 第88页 |