| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-36页 |
| 1 稻瘟病菌概述 | 第10-19页 |
| ·稻瘟病菌的侵染循环 | 第11-15页 |
| ·稻瘟病菌孢子的传播和萌发 | 第11-12页 |
| ·稻瘟病菌附着孢的形成 | 第12-13页 |
| ·稻瘟病菌侵染栓形成和侵入 | 第13-14页 |
| ·稻瘟病菌侵入后的菌丝分化与扩展 | 第14页 |
| ·稻瘟病菌侵入后的产孢与再侵染 | 第14-15页 |
| ·稻瘟病菌基因组草图的绘制及实验室研究 | 第15页 |
| ·稻瘟病菌致病相关基因 | 第15-18页 |
| ·稻瘟病菌的防治 | 第18-19页 |
| 2 细胞自噬概述 | 第19-35页 |
| ·酵母中细胞自噬发生的分子机制 | 第20-23页 |
| ·酵母中细胞自噬的诱导 | 第20-21页 |
| ·物质(细胞自噬作用对象)的选择和包装 | 第21页 |
| ·自噬泡的成核过程 | 第21页 |
| ·自噬泡的延伸和完成 | 第21-22页 |
| ·复原 | 第22页 |
| ·自噬泡的融合 | 第22页 |
| ·自噬泡的分解 | 第22-23页 |
| ·高等真核生物细胞自噬发生的分子机制 | 第23-26页 |
| ·压力诱导的分化和发育中的细胞自噬现象 | 第26-27页 |
| ·发育细胞死亡中的细胞自噬 | 第27-30页 |
| ·正常发育过程中细胞自噬基因的作用 | 第30-32页 |
| ·细胞自噬和细胞生长控制 | 第32-33页 |
| ·细胞自噬做为抗衰老机制 | 第33-35页 |
| 3 本研究的意义和内容 | 第35-36页 |
| 第二章 材料和方法 | 第36-56页 |
| 1 试验菌株 | 第36页 |
| ·大肠杆菌菌株 | 第36页 |
| ·稻瘟病菌菌株 | 第36页 |
| ·农杆菌菌株 | 第36页 |
| 2 实验植物 | 第36页 |
| 3 培养基 | 第36-39页 |
| ·LB培养基 | 第36页 |
| ·SOB培养基 | 第36-37页 |
| ·CM培养基 | 第37-38页 |
| ·用于稻瘟病菌的单孢分离的水琼脂培养基 | 第38页 |
| ·OMA燕麦培养基 | 第38页 |
| ·农杆菌诱导培养基 | 第38-39页 |
| 4 抗生素的配置 | 第39页 |
| 5 菌株的保存和培养 | 第39页 |
| 6 PCR | 第39-40页 |
| ·常规PCR | 第39-40页 |
| ·LD-PCR | 第40页 |
| 7 序列测定 | 第40-41页 |
| 8 DNA分析 | 第41-43页 |
| ·DNA的琼脂糖电泳 | 第41-42页 |
| ·DNA片段的凝胶回收基因组 | 第42页 |
| ·DNA酶切 | 第42页 |
| ·DNA酶切片段的去磷酸化 | 第42-43页 |
| ·酶链接反应 | 第43页 |
| 9 E.Coli DH5a感受态细胞的制备 | 第43-44页 |
| 10 大肠杆菌转化 | 第44-45页 |
| 11 蓝白斑筛选 | 第45页 |
| 12 质粒的提取 | 第45-47页 |
| ·小量质粒DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·CTAB法提取质粒 | 第46-47页 |
| ·中量质粒DNA提取 | 第47页 |
| 13 农杆菌的冻融法转化 | 第47-48页 |
| 14 稻瘟病菌的T-DNA转化 | 第48页 |
| 15 稻瘟病菌基因组DNA提取 | 第48-50页 |
| ·稻瘟病菌菌丝的收集 | 第48-49页 |
| ·CTAB法提取稻瘟病菌基因组DNA | 第49-50页 |
| 16 稻瘟病菌基因组DNA Southern杂交(DIG) | 第50-53页 |
| ·所需准备的试剂 | 第50页 |
| ·DIG-DNA标记 | 第50-51页 |
| ·基因组DNA的消化、电泳和变性 | 第51页 |
| ·DNA转膜 | 第51-52页 |
| ·Southern杂交过程 | 第52页 |
| ·免疫显色 | 第52-53页 |
| 17 稻瘟病菌突变体的表型分析 | 第53-56页 |
| ·稻瘟病菌产孢量分析 | 第53页 |
| ·稻瘟病菌孢子萌发率和附着胞形成率分析 | 第53-54页 |
| ·稻瘟病菌大麦离体接种 | 第54页 |
| ·稻瘟病菌水稻苗喷雾接种 | 第54页 |
| ·荧光表达的观察 | 第54-56页 |
| 第三章 结果与分析 | 第56-74页 |
| 1 稻瘟病菌细胞自噬相关基因MgATG11、MgATG13、MgATG17 | 第56页 |
| 2 基因敲除载体的构建 | 第56-58页 |
| 3 突变子的获得 | 第58-61页 |
| 4 基因互补载体的构建 | 第61页 |
| 5 突变体表型分析 | 第61-66页 |
| ·突变体的菌落形态 | 第61-62页 |
| ·突变体的生长速度 | 第62-63页 |
| ·产孢量 | 第63-64页 |
| ·孢子萌发和附着胞形成延迟 | 第64-66页 |
| 6 致病性分析 | 第66-70页 |
| ·大麦离体接种 | 第66-67页 |
| ·水稻喷雾接种 | 第67-70页 |
| 7 基因的细胞定位 | 第70-74页 |
| ·融合载体的构建 | 第70-71页 |
| ·荧光观察 | 第71-74页 |
| 第四章 试验总结与展望 | 第74-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |
| 附录一 本研究所用引物和酶切位点 | 第86-87页 |