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水稻白叶枯病菌PXO99~A中tal4基因功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语第11-12页
上篇 文献综述第12-29页
 第一章 水稻白叶枯病菌tal基因的研究进展第13-21页
  1 tal家族基因的由来及在黄单胞菌中的分布第13-15页
  2 tal家族基因的特征第15-16页
  3 tal家族基因功能第16-17页
   ·tal家族基因无毒性功能第17页
   ·tal家族基因毒性功能第17页
  4 tal家族基因编码蛋白(TALE)的结构和功能第17-21页
 第二章 水稻白叶枯病菌PX099~A中tal基因研究现状第21-25页
  1 PX099~A中无毒基因研究进展第21-24页
  2 PX099~A中毒性基因研究进展第24-25页
 第三章 噻枯哇杀细菌剂的研究进展第25-29页
  1 噻枯唑的基本特征第25-26页
  2 噻枯唑的毒性、残留及降解第26页
  3 噻枯唑防治水稻白叶枯病研究第26-29页
   ·水稻白叶枯病菌对噻枯唑的抗药性第26-27页
   ·噻枯唑对水稻白叶枯病菌的作用机理研究进展第27-29页
下篇 研究内容第29-79页
 第一章 tal4基因缺失突变菌株的构建及功能互补第31-51页
  摘要第31页
  ABSTRACT第31-32页
  1 材料与方法第32-46页
   ·菌株和质粒第32-33页
   ·主要试剂第33-34页
   ·引物设计与合成第34-35页
   ·基因组DNA的提取第35-36页
   ·Overlap-PCR法构建tal4基因同源交换重组体第36-37页
   ·琼脂糖凝胶DNA片段回收第37-38页
   ·PCR产物与pMD18-T载体连接第38页
   ·连接产物的转化第38-39页
   ·质粒的提取第39-40页
   ·酶切第40页
   ·序列测定第40页
   ·黄单胞菌感受态的制备第40-41页
   ·水稻黄单胞菌的转化法第41-42页
   ·菌落PCR验证第42-43页
   ·Southern杂交第43-45页
   ·回补菌株的构建第45-46页
  2 结果与分析第46-49页
   ·tal4基因缺失重组体的构建第46-47页
   ·水稻白叶枯病菌tal4基因标记交换突变菌株的获得第47页
   ·水稻白叶枯病菌tal4基因缺失突变菌株的验证第47-48页
   ·tal4基因缺失突变菌株回补菌株的构建第48页
   ·tal4基因回补菌株的PCR验证第48-49页
  3 讨论第49-51页
 第二章 tal4基因缺失对菌株毒力及抗逆能力的影响第51-65页
  摘要第51页
  ABSTRACT第51-52页
  1 材料与方法第52-55页
   ·供试菌株、质粒及植物材料第52页
   ·主要试剂第52-53页
   ·水稻白叶枯病菌对寄主水稻毒力的测定第53页
   ·接种叶片中细菌生长曲线的测定第53页
   ·水稻白叶枯病菌对温度、渗透压及酸碱胁迫的测定第53-54页
   ·水稻白叶枯病菌对噻枯唑的敏感性测定第54-55页
   ·PX099△tal4中卡那霉素抗性基因的消除第55页
   ·数据统计分析第55页
  2 结果与分析第55-62页
   ·tal4基因缺失突变菌株对水稻毒力的测定第55-56页
   ·tal4基因缺失突变菌株对温度、渗透压及酸碱胁迫的反应测定第56-57页
   ·tal4基因缺失突变菌株对噻枯唑的敏感性测定第57-60页
   ·水稻白叶枯病菌PX099△tal4中卡那霉素基因敲除突变菌株的验证第60-61页
   ·PX099△tal4AKm在NA平板上对噻枯唑的敏感性测定第61-62页
  3 讨论第62-65页
 第三章 tal4基因在菌株对噻枯唑抗性中的作用机制初探第65-79页
  摘要第65页
  ABSTRACT第65-66页
  1 材料与方法第66-73页
   ·供试菌株第66页
   ·主要试剂第66页
   ·特异性引物的设计与合成第66-67页
   ·细菌总RNA的提取第67-68页
   ·反转录第68页
   ·qPCR检测抗药相关基因的定量表达第68-69页
   ·实时定量PCR的结果分析第69页
   ·rrs同源交换重组体的构建第69-72页
   ·rrs缺失突变菌株的构建第72-73页
  2 结果与分析第73-78页
   ·tal4基因缺失对水稻白叶枯病菌中抗药相关基因表达的影响第73-74页
   ·rrs基因缺失重组体的构建第74页
   ·rrs基因缺失重组体的验证第74-75页
   ·rrs基因缺失突变菌株的获得第75-77页
   ·rrs基因缺失突变菌株对噻枯唑的敏感性测定第77-78页
  3 讨论第78-79页
全文总结第79-81页
参考文献第81-87页
附录 本论文涉及载体的图谱及其特性第87-89页
致谢第89-91页
本论文研究受资助基金第91页
攻读学位期间发表的学术论文第91页

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