摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
上篇 文献综述 | 第12-29页 |
第一章 水稻白叶枯病菌tal基因的研究进展 | 第13-21页 |
1 tal家族基因的由来及在黄单胞菌中的分布 | 第13-15页 |
2 tal家族基因的特征 | 第15-16页 |
3 tal家族基因功能 | 第16-17页 |
·tal家族基因无毒性功能 | 第17页 |
·tal家族基因毒性功能 | 第17页 |
4 tal家族基因编码蛋白(TALE)的结构和功能 | 第17-21页 |
第二章 水稻白叶枯病菌PX099~A中tal基因研究现状 | 第21-25页 |
1 PX099~A中无毒基因研究进展 | 第21-24页 |
2 PX099~A中毒性基因研究进展 | 第24-25页 |
第三章 噻枯哇杀细菌剂的研究进展 | 第25-29页 |
1 噻枯唑的基本特征 | 第25-26页 |
2 噻枯唑的毒性、残留及降解 | 第26页 |
3 噻枯唑防治水稻白叶枯病研究 | 第26-29页 |
·水稻白叶枯病菌对噻枯唑的抗药性 | 第26-27页 |
·噻枯唑对水稻白叶枯病菌的作用机理研究进展 | 第27-29页 |
下篇 研究内容 | 第29-79页 |
第一章 tal4基因缺失突变菌株的构建及功能互补 | 第31-51页 |
摘要 | 第31页 |
ABSTRACT | 第31-32页 |
1 材料与方法 | 第32-46页 |
·菌株和质粒 | 第32-33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·引物设计与合成 | 第34-35页 |
·基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
·Overlap-PCR法构建tal4基因同源交换重组体 | 第36-37页 |
·琼脂糖凝胶DNA片段回收 | 第37-38页 |
·PCR产物与pMD18-T载体连接 | 第38页 |
·连接产物的转化 | 第38-39页 |
·质粒的提取 | 第39-40页 |
·酶切 | 第40页 |
·序列测定 | 第40页 |
·黄单胞菌感受态的制备 | 第40-41页 |
·水稻黄单胞菌的转化法 | 第41-42页 |
·菌落PCR验证 | 第42-43页 |
·Southern杂交 | 第43-45页 |
·回补菌株的构建 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-49页 |
·tal4基因缺失重组体的构建 | 第46-47页 |
·水稻白叶枯病菌tal4基因标记交换突变菌株的获得 | 第47页 |
·水稻白叶枯病菌tal4基因缺失突变菌株的验证 | 第47-48页 |
·tal4基因缺失突变菌株回补菌株的构建 | 第48页 |
·tal4基因回补菌株的PCR验证 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
第二章 tal4基因缺失对菌株毒力及抗逆能力的影响 | 第51-65页 |
摘要 | 第51页 |
ABSTRACT | 第51-52页 |
1 材料与方法 | 第52-55页 |
·供试菌株、质粒及植物材料 | 第52页 |
·主要试剂 | 第52-53页 |
·水稻白叶枯病菌对寄主水稻毒力的测定 | 第53页 |
·接种叶片中细菌生长曲线的测定 | 第53页 |
·水稻白叶枯病菌对温度、渗透压及酸碱胁迫的测定 | 第53-54页 |
·水稻白叶枯病菌对噻枯唑的敏感性测定 | 第54-55页 |
·PX099△tal4中卡那霉素抗性基因的消除 | 第55页 |
·数据统计分析 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-62页 |
·tal4基因缺失突变菌株对水稻毒力的测定 | 第55-56页 |
·tal4基因缺失突变菌株对温度、渗透压及酸碱胁迫的反应测定 | 第56-57页 |
·tal4基因缺失突变菌株对噻枯唑的敏感性测定 | 第57-60页 |
·水稻白叶枯病菌PX099△tal4中卡那霉素基因敲除突变菌株的验证 | 第60-61页 |
·PX099△tal4AKm在NA平板上对噻枯唑的敏感性测定 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-65页 |
第三章 tal4基因在菌株对噻枯唑抗性中的作用机制初探 | 第65-79页 |
摘要 | 第65页 |
ABSTRACT | 第65-66页 |
1 材料与方法 | 第66-73页 |
·供试菌株 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66页 |
·特异性引物的设计与合成 | 第66-67页 |
·细菌总RNA的提取 | 第67-68页 |
·反转录 | 第68页 |
·qPCR检测抗药相关基因的定量表达 | 第68-69页 |
·实时定量PCR的结果分析 | 第69页 |
·rrs同源交换重组体的构建 | 第69-72页 |
·rrs缺失突变菌株的构建 | 第72-73页 |
2 结果与分析 | 第73-78页 |
·tal4基因缺失对水稻白叶枯病菌中抗药相关基因表达的影响 | 第73-74页 |
·rrs基因缺失重组体的构建 | 第74页 |
·rrs基因缺失重组体的验证 | 第74-75页 |
·rrs基因缺失突变菌株的获得 | 第75-77页 |
·rrs基因缺失突变菌株对噻枯唑的敏感性测定 | 第77-78页 |
3 讨论 | 第78-79页 |
全文总结 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
附录 本论文涉及载体的图谱及其特性 | 第87-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
本论文研究受资助基金 | 第91页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第91页 |