Wdr5通过Wnt通路促进肝癌细胞增殖的研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 第一章 实验试剂与材料 | 第10-12页 |
| ·细胞来源与特点 | 第10页 |
| ·HepG2细胞株 | 第10页 |
| ·Huh7细胞株 | 第10页 |
| ·实验主要试剂 | 第10页 |
| ·实验主要仪器 | 第10-12页 |
| 第二章 实验方法 | 第12-32页 |
| ·细胞培养 | 第12-15页 |
| ·细胞复苏 | 第12页 |
| ·细胞培养 | 第12-13页 |
| ·细胞传代 | 第13-14页 |
| ·细胞计数 | 第14页 |
| ·细胞冻存 | 第14-15页 |
| ·Wdr5- shRNA构建、病毒包装及转染 | 第15-18页 |
| ·shRNAi原理与设计 | 第15-16页 |
| ·慢病毒载体包装与纯化 | 第16-17页 |
| ·慢病毒转染 | 第17-18页 |
| ·RNA提取 | 第18-20页 |
| ·RNA提取原理 | 第18页 |
| ·RNA提取步骤 | 第18-19页 |
| ·RNA浓度及纯度测定（紫外吸收法） | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第20-24页 |
| ·PCR原理 | 第20-21页 |
| ·引物设计及合成 | 第21-22页 |
| ·实验步骤 | 第22-23页 |
| ·结果分析 | 第23-24页 |
| ·蛋白质印迹实验 | 第24-28页 |
| ·实验原理 | 第24页 |
| ·蛋白样品制备 | 第24-25页 |
| ·蛋白含量测定 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第25-27页 |
| ·转膜 | 第27页 |
| ·免疫交杂与显色 | 第27页 |
| ·曝光 | 第27页 |
| ·凝胶图像分析 | 第27-28页 |
| ·部分溶液配置方法 | 第28页 |
| ·MTT实验 | 第28-30页 |
| ·原理 | 第28-29页 |
| ·实验步骤 | 第29页 |
| ·注意事项 | 第29-30页 |
| ·克隆形成实验 | 第30-31页 |
| ·原理 | 第30页 |
| ·实验步骤 | 第30-31页 |
| ·统计学处理 | 第31-32页 |
| 第三章 结果 | 第32-36页 |
| ·Wdr5-shRNA慢病毒转染肝癌细胞系鉴定 | 第32页 |
| ·Wdr5-shRNA干扰效果检测 | 第32-33页 |
| ·干扰Wdr5能抑制肝癌细胞系增殖 | 第33-34页 |
| ·干扰Wdr5能抑制Wnt通路关键基因表达 | 第34-36页 |
| 第四章 结论 | 第36-37页 |
| 第五章 讨论与展望 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 在学期间的研究成果 | 第42-43页 |
| 缩略词表 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
