| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| ·表观遗传学概况 | 第12-15页 |
| ·表观遗传学简介 | 第12页 |
| ·DNA甲基化 | 第12-14页 |
| ·组蛋白修饰 | 第14-15页 |
| ·蛋白质翻译后修饰 | 第15-19页 |
| ·蛋白质甲基化和去甲基化修饰 | 第16-17页 |
| ·蛋白质泛素化和去泛素化修饰 | 第17-18页 |
| ·蛋白质翻译后修饰生物学功能 | 第18-19页 |
| ·UHRF1蛋白研究进展 | 第19-22页 |
| ·UHRF1蛋白简介 | 第19-20页 |
| ·UHRF1参与DNA甲基化 | 第20-21页 |
| ·UHRF1与细胞周期 | 第21-22页 |
| ·UHRF1的生物学功能 | 第22页 |
| ·SET8蛋白研究进展 | 第22-28页 |
| ·SET8简介 | 第22-23页 |
| ·SET8甲基化组蛋白 | 第23-24页 |
| ·SET8甲基化非组蛋白 | 第24页 |
| ·SET8与细胞周期 | 第24-26页 |
| ·SET8的生物学功能 | 第26-28页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第28-59页 |
| ·实验材料 | 第28-34页 |
| ·质粒 | 第28页 |
| ·抗体 | 第28-29页 |
| ·引物 | 第29-30页 |
| ·主要试剂 | 第30-32页 |
| ·主要仪器 | 第32-34页 |
| ·主要细胞 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-59页 |
| ·质粒构建 | 第34-37页 |
| ·突变体的构建 | 第37-38页 |
| ·小量质粒抽提(TIANGEN质粒小提试剂盒) | 第38-39页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第39-42页 |
| ·免疫染色 | 第42-43页 |
| ·DNA甲基化免疫染色 | 第43-44页 |
| ·GST融合蛋白纯化 | 第44-47页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期 | 第47-49页 |
| ·RNA提取、反转和实时定量PCR | 第49-50页 |
| ·HPLC检测基因组DNA整体甲基化水平 | 第50-53页 |
| ·抗体纯化 | 第53-54页 |
| ·免疫共沉淀实验Co-IP | 第54-57页 |
| ·体内泛素化实验 | 第57-59页 |
| 第三章 实验结果及分析 | 第59-81页 |
| ·过量表达SET8可降低UHRF1蛋白水平 | 第59页 |
| ·SET8能促进UHRF1的泛素化降解 | 第59-62页 |
| ·SET8甲基化酶活性是促进UHRF1泛素化修饰所必需的 | 第62-63页 |
| ·质谱鉴定UHRF1的甲基化及泛素化位点 | 第63-65页 |
| ·UHRF1甲基化位点为K385,主要的泛素化位点为K500 | 第65-68页 |
| ·UHRF1的K385和K500突变体在细胞周期中的变化 | 第68-72页 |
| ·SET8与UHRF1具有相互作用 | 第72-75页 |
| ·不同细胞系中SET8敲低导致UHRF1蛋白水平上升 | 第75-77页 |
| ·降低细胞SET8水平影响基因组DNA整体甲基化水平 | 第77-81页 |
| 总结与展望 | 第81-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
