| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 缩略词一览表 | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-26页 |
| ·木质纤维素结构及降解复合酶 | 第10-14页 |
| ·木质纤维素降解酶的协同作用 | 第14-18页 |
| ·木质纤维素降解酶的作用模式 | 第18-20页 |
| ·菌群的木质纤维素代谢途径 | 第20-22页 |
| ·宏基因组学分析技术 | 第22-23页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第23-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·培养基和试剂 | 第26-27页 |
| ·重组表达载体pPIC9K-pcmnp-his的构建 | 第27-28页 |
| ·毕赤酵母GS115感受态制备 | 第28页 |
| ·重组载体pPIC9K-pcmnp-his转化毕赤酵母 | 第28页 |
| ·毕赤酵母转化子筛选鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组载体pPIC9K-pcmnp-his在毕赤酵母中的诱导表达 | 第29页 |
| ·锰过氧化物酶活性的检测 | 第29页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第29-30页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第30页 |
| ·滤纸酶活(FPA,filter paper activity)的检测 | 第30-31页 |
| ·外切葡聚糖酶活性的检测 | 第31页 |
| ·内切葡聚糖酶活性的测定 | 第31-32页 |
| ·木聚糖酶活性的检测 | 第32页 |
| ·漆酶活性的检测 | 第32页 |
| ·LiP活性的检测 | 第32页 |
| ·复合酶水解体系的构建 | 第32-33页 |
| ·协同系数的计算 | 第33页 |
| ·菌群EMSD5基因组DNA的提取 | 第33页 |
| ·菌群EMSD5的保存 | 第33页 |
| ·菌群EMSD5的活化 | 第33-34页 |
| ·菌群EMSD5产酶 | 第34页 |
| ·Ch2-2种子液制备 | 第34页 |
| ·Ch2-2液体产酶 | 第34页 |
| ·Ch2-2粗酶粉的制备 | 第34页 |
| ·复合酶体系的构建 | 第34-35页 |
| ·还原糖浓度的测定 | 第35页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·EMSD5宏基因组测序 | 第36-40页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第40-100页 |
| ·包含木质素酶的Ch2-2胞外酶与纤维素酶、木聚糖酶的协同降解效果 | 第40-55页 |
| ·枝孢霉Ch2-2木质素酶粗酶的制备及其协同降解效果 | 第40-45页 |
| ·复合酶系的优化及其中低温适应特性 | 第45-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| ·木质纤维素降解菌群EMSD5的群落结构和降解模式 | 第55-90页 |
| ·菌群EMSD5胞外酶活力检测 | 第55-56页 |
| ·菌群EMSD5基因组DNA的提取 | 第56-57页 |
| ·数据预处理 | 第57页 |
| ·组装 | 第57-59页 |
| ·基因预测 | 第59页 |
| ·物种注释 | 第59-62页 |
| ·功能注释 | 第62-85页 |
| ·木质纤维素酶的降解模式分析 | 第85-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| ·锰过氧化物酶与木聚糖酶的协同作用 | 第90-100页 |
| ·携带His标签的锰过氧化物酶基因pcmnp-his的异源表达 | 第90-93页 |
| ·菌群EMSD5木聚糖酶新基因的扩增 | 第93-95页 |
| ·携带His标签的木聚糖酶基因exyl-his的异源表达 | 第95-97页 |
| ·锰过氧化物酶PcMnP与木聚糖酶Exy1协同降解菊芋茎秆 | 第97-99页 |
| ·小结 | 第99-100页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第100-104页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| ·创新点 | 第102-103页 |
| ·展望 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 个人简介 | 第116页 |
