摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
前言 | 第9页 |
第一篇 文献综述 | 第9-16页 |
·糖尿病 | 第9-10页 |
·生长分化因子-15 | 第10-14页 |
·hGDF-15的发现 | 第10页 |
·hGDF-15的基因分子结构和表达调控 | 第10-12页 |
·hGDF-15的信号通路 | 第12页 |
·hGDF-15与代谢疾病 | 第12-13页 |
·hGDF-15与糖尿病 | 第13页 |
·hGDF-15其他领域中的研究 | 第13-14页 |
·糖尿病动物模型 | 第14页 |
·研究的目的和意义 | 第14-16页 |
第二篇 研究内容 | 第16-62页 |
第一章 人GDF-15的克隆及重组质粒的构建 | 第16-36页 |
·材料 | 第16-19页 |
·质粒载体与工程菌 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·主要仪器 | 第17-18页 |
·公司服务 | 第18页 |
·主要试剂配制 | 第18-19页 |
·方法 | 第19-25页 |
·hGDF-15成熟肽基因引物设计 | 第19页 |
·hGDF-15成熟肽基因的克隆 | 第19-21页 |
·重组pET-28a-h GDF-15 原核表达载体的构建及鉴定 | 第21-25页 |
·hGDF-15基因序列及生物信息学分析 | 第25页 |
·结果与分析 | 第25-33页 |
·hGDF-15成熟肽基因的克隆 | 第25页 |
·重组pET-28a-hGDF-15表达载体的鉴定 | 第25-26页 |
·hGDF-15基因序列及生物信息学分析 | 第26-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-36页 |
第二章 人GDF-15蛋白的表达及表达条件优化 | 第36-48页 |
·材料 | 第36-38页 |
·实验材料 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36-37页 |
·主要试剂配制 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·hGDF-15蛋白的诱导表达 | 第38页 |
·hGDF-15蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第38-39页 |
·hGDF-15蛋白含量分析及表达条件的优化 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-46页 |
·hGDF-15蛋白诱导表达结果 | 第40-44页 |
·hGDF-15蛋白含量分析及表达条件的优化 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第三章 人GDF-15蛋白的鉴定和纯化 | 第48-55页 |
·材料 | 第48-49页 |
·实验材料 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·主要试剂配制 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-51页 |
·Western blot鉴定 | 第49-50页 |
·hGDF-15蛋白纯化 | 第50-51页 |
·结果与分析 | 第51-53页 |
·Western blot鉴定结果 | 第51-52页 |
·hGDF-15蛋白纯化结果 | 第52页 |
·hGDF-15冻干结果 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第四章 Ⅱ糖尿病动物模型的建立及人GDF-15蛋白药理活性初步研究 | 第55-62页 |
·材料 | 第55-56页 |
·实验材料 | 第55页 |
·主要试剂 | 第55页 |
·主要仪器 | 第55页 |
·主要试剂配制 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-57页 |
·高脂动物模型建立方法 | 第56页 |
·Ⅱ型糖尿病模型建立方法 | 第56页 |
·hGDF-15药理活性 | 第56-57页 |
·结果与分析 | 第57-60页 |
·实验小鼠一般指标 | 第57-58页 |
·高脂组血糖变化 | 第58-59页 |
·hGDF-15药理活性结果 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
·小结 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |