| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-14页 |
| ·细胞凋亡及特征 | 第8页 |
| ·细胞凋亡(APOPTOSIS)的生理意义 | 第8-9页 |
| ·BCL-2 家族 | 第9-10页 |
| ·Bad | 第10-11页 |
| ·Bad与Bcl-2 家族 | 第11页 |
| ·Gelsolin | 第11-12页 |
| ·串联亲和纯化 | 第12-14页 |
| 第2章 FLAG-HA-BAD双标签真核表达载体的构建 | 第14-22页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·主要试剂配制 | 第14页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-19页 |
| ·细胞培养 | 第15页 |
| ·Trizol提取细胞RNA | 第15页 |
| ·RNA反转录cDNA | 第15-16页 |
| ·PCR扩增目的基因及基因克隆 | 第16-17页 |
| ·PCR阳性克隆鉴定 | 第17-18页 |
| ·质粒小量提取 | 第18页 |
| ·去内毒素质粒大量提取 | 第18-19页 |
| ·实验结果 | 第19-21页 |
| ·融合质粒的构建与鉴定 | 第19-21页 |
| ·实验讨论 | 第21-22页 |
| 第3章 BAD相互作用蛋白质筛选的串联亲和纯化及质谱分析 | 第22-29页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-25页 |
| ·质粒转染细胞 | 第22-23页 |
| ·Western blotting检测蛋白表达 | 第23-25页 |
| ·TAP亲和纯化 | 第25页 |
| ·质谱检测和分析 | 第25页 |
| ·实验结果 | 第25-28页 |
| ·瞬时转染 | 第25-26页 |
| ·TAP亲和纯化及蛋白复合体的分离纯化与鉴定 | 第26-27页 |
| ·质谱分析 | 第27-28页 |
| ·实验讨论 | 第28-29页 |
| 第4章 免疫共沉淀（CO-IP）验证蛋白相互作用 | 第29-32页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·主要试剂和抗体 | 第29页 |
| ·主要试剂配制 | 第29页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·免疫共沉淀（Co-IP）验证蛋白相互作用 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-31页 |
| ·免疫共沉淀验证Bad与Gelsolin相互作用 | 第30-31页 |
| ·实验讨论 | 第31-32页 |
| 第5章 讨论 | 第32-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 作者简介 | 第39页 |