| 英文缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-21页 |
| 参考文献 | 第19-21页 |
| 第一章 水母发光蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第21-43页 |
| 一、 材料与方法 | 第21-27页 |
| 1. 材料 | 第21-22页 |
| 2. 水母发光蛋白基因的获取、优化及合成 | 第22-23页 |
| 3. 原核表达载体构建 | 第23-24页 |
| 4. 表达与纯化 | 第24-26页 |
| 5. 发光活性测定 | 第26-27页 |
| 二、 结果 | 第27-40页 |
| 1. 水母发光蛋白基因的获取、优化及合成 | 第27-32页 |
| 2. 原核表达载体构建 | 第32-33页 |
| 3. 表达与纯化 | 第33-37页 |
| 4. 发光活性测定 | 第37-40页 |
| 三、 讨论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-43页 |
| 第二章 细胞传感器的构建 | 第43-66页 |
| 一、 材料与方法 | 第44-48页 |
| 1. 材料 | 第44页 |
| 2. 细胞培养 | 第44页 |
| 3. pCMV-His-AEQ 的构建 | 第44页 |
| 4. pEGFP-AEQ 的构建 | 第44-45页 |
| 5. 细胞对 G418 的抗性试验 | 第45页 |
| 6. Aequorin 在细胞中的表达 | 第45-46页 |
| 7. 细胞发光试验 | 第46页 |
| 8. 细胞单克隆的获取 | 第46页 |
| 9. 细胞内基因拷贝数的测定 | 第46-47页 |
| 10. RBL-2H3 细胞检测模型的优化 | 第47页 |
| 11. 细胞发光遗传稳定性试验 | 第47-48页 |
| 二、 结果 | 第48-63页 |
| 1. pCMV-His-AEQ 的构建 | 第48-49页 |
| 2. pEGFP-AEQ 的构建 | 第49-51页 |
| 3. 细胞对 G418 的抗性试验 | 第51-52页 |
| 4. Aequorin 在细胞中的表达 | 第52-54页 |
| 5. 细胞发光试验 | 第54-55页 |
| 6. 细胞监测模型的建立 | 第55-56页 |
| 7. 细胞单克隆的建立及拷贝数测定 | 第56-58页 |
| 8. RBL-2H3 细胞检测模型的优化 | 第58-62页 |
| 9. 细胞发光的遗传稳定性 | 第62-63页 |
| 三、 讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-66页 |
| 第三章 检测用 IgE 抗体在哺乳动物细胞中的表达 | 第66-91页 |
| 一、 材料和方法 | 第68-73页 |
| 1. 材料 | 第68页 |
| 2. 小鼠 IgE 重链恒定区基因序列的获取 | 第68页 |
| 3. RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第68-69页 |
| 4. 抗体轻链可变区基因序列的获取 | 第69页 |
| 5. 抗体重链可变区基因序列的获取 | 第69-70页 |
| 6. 轻链可变区和重链可变区的拼接 | 第70-71页 |
| 7. 抗体 Kappa 链基因序列的获取 | 第71页 |
| 8. CD33 信号肽和免疫球蛋白 kappa 链信号肽的构建 | 第71页 |
| 9. 抗 O157H7 IgE 抗体的表达与鉴定 | 第71-73页 |
| 二、 结果 | 第73-88页 |
| 1. 小鼠 IgE 重链恒定区基因序列的获取 | 第73页 |
| 2. 细胞总 RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第73-74页 |
| 3. 抗体轻链可变区基因序列的获取及克隆 | 第74-77页 |
| 4. 抗体重链可变区基因序列的获取及克隆 | 第77-81页 |
| 5. 轻链可变区和重链可变区的拼接 | 第81-83页 |
| 6. 抗体 Kappa 链全序列的获取 | 第83-85页 |
| 7. CD33 信号肽的克隆 | 第85-86页 |
| 8. 抗 O157H7 IgE 抗体的表达 | 第86-88页 |
| 三、 讨论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 第四章 检测用 IgE 抗体在酵母细胞中的表达 | 第91-108页 |
| 一、 材料与方法 | 第92-96页 |
| 1. 材料 | 第92页 |
| 2. 载体的构建 | 第92页 |
| 3. 酵母感受态的制备 | 第92-93页 |
| 4. 质粒的准备及转化 | 第93页 |
| 5. 蛋白的表达与鉴定 | 第93-94页 |
| 6. 纯化 | 第94页 |
| 7. 蛋白的浓缩及定量 | 第94页 |
| 8. 嵌合 IgE 与 BoNT/B 的相互作用 | 第94-95页 |
| 9. 用于细胞传感器检测试验 | 第95-96页 |
| 二、 结果 | 第96-104页 |
| 1. 载体的构建 | 第96-98页 |
| 2. 蛋白的表达与纯化 | 第98-101页 |
| 3. 蛋白定量 | 第101-102页 |
| 4. 嵌合 IgE 与 BoNT/B 的相互作用 | 第102页 |
| 5. 用于细胞传感器检测试验 | 第102-104页 |
| 三、 讨论 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-108页 |
| 总结 | 第108-109页 |
| 附录 | 第109-115页 |
| 综述 | 第115-123页 |
| 参考文献 | 第119-123页 |
| 个人简历 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
