| 导师简介 | 第1页 |
| 课题组成员 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一部分引言 | 第14-16页 |
| 第二部分 PACE4 对类风湿性关节炎滑膜细胞的生物学功能的影响 | 第16-36页 |
| 1 实验材料 | 第16-17页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·仪器 | 第16-17页 |
| 2 研究方法 | 第17-26页 |
| ·样品收集 | 第17页 |
| ·原代培养 | 第17页 |
| ·滑膜成纤维细胞纯度鉴定 | 第17-18页 |
| ·PACE4 在 RA、OA 和 AS 组织中表达的检测 | 第18-22页 |
| ·利用 siRNA 特异性抑制 RASFs 中 PACE4 的表达（瞬时转染） | 第22-23页 |
| ·抑制 PACE4 表达对 RASFs 细胞生物学功能的影响 | 第23-24页 |
| ·ELISA 方法测定细胞炎性因子 IL-1α, IL-1β, IL-17 和 TNF-α | 第24页 |
| ·抑制 PACE4 表达后对 RASFs 细胞周期和凋亡的影响 | 第24-25页 |
| ·不同浓度雌激素诱导 RASFs 中 PACE4 的表达 | 第25页 |
| ·基因芯片检测 PACE4 沉默后 RASFs 中 PACE4 下游基因的表达情况 | 第25-26页 |
| ·统计学方法 | 第26页 |
| 3 实验结果 | 第26-33页 |
| ·成纤维细胞形态 | 第26页 |
| ·RA 成纤维细胞纯度鉴定 | 第26-27页 |
| ·PACE4 在 RA、OA 和 AS 患者组织中的表达 | 第27-28页 |
| ·siRNA 特异性沉默 RASFs 中 PACE4 的表达 | 第28页 |
| ·抑制 PACE4 表达对 RASFs 的增殖、迁移和侵袭的影响 | 第28-30页 |
| ·ELISA 方法检测到 PACE4 沉默后影响炎性因子 TNF-α的表达降低 | 第30页 |
| ·在 RASFs 中沉默 PACE4 对细胞周期和凋亡的影响 | 第30-31页 |
| ·雌激素对 RASFs 中 PACE4 表达的诱导 | 第31-32页 |
| ·基因芯片检测 PACE4 沉默后 RASFs 中不同基因的表达 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-36页 |
| 第三部分 PACE4 对乳腺癌细胞 MDA-MB-231 的生物学活性的影响以及作用机制的研究 | 第36-52页 |
| 1 实验材料 | 第36-37页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| 2 研究方法 | 第37-42页 |
| ·引物设计及合成 | 第37-38页 |
| ·利用 siRNA 特异性抑制乳腺癌细胞 MDA-MB-231 中 PACE4 的表达（瞬时转染） | 第38页 |
| ·细胞总 RNA 的提取 | 第38页 |
| ·实时荧光定量 PCR 测定 PACE4 的 mRNA 水平的表达 | 第38页 |
| ·Western Blot 分析 | 第38页 |
| ·抑制 PACE4 表达对乳腺癌 MDA-MB-231 细胞生物学功能的影响 | 第38-39页 |
| ·不同浓度雌激素诱导乳腺癌 MDA-MB-231 和 MCF-7 中 PACE4 的表达 | 第39-40页 |
| ·PACE4 下游基因的检测 | 第40页 |
| ·Re-PACE4 重组蛋白对乳腺癌细胞 MDA-MB-231 生物学功能和相关信号通路的检测 | 第40-42页 |
| ·统计学方法 | 第42页 |
| 3 实验结果 | 第42-49页 |
| ·在乳腺癌细胞 MDA-MB-231 中采用 si-RNA 成功沉默 PACE4 的表达 | 第42-43页 |
| ·PACE4 沉默后 MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低 | 第43-45页 |
| ·PACE4 沉默后乳腺癌细胞周期阻滞于 G0-G1 期 | 第45-46页 |
| ·雌激素诱导对乳腺癌细胞 MDA-MB-231 和 MCF-7 中 PACE4 的表达无显著影响 | 第46页 |
| ·乳腺癌细胞 MDA-MB-231 中 PACE4 沉默后 MMP9、IGF-2、和 MPZL2 表达下调 | 第46-47页 |
| ·Re-PACE4 重组蛋白促进乳腺癌 MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移和侵袭 | 第47-49页 |
| ·重组蛋白对信号通路 Erk 和 Wnt3a 的激活 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |
| 综述 | 第62-68页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 攻读硕士生期间发表论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
