| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-26页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| ·宏基因组文库 | 第11-20页 |
| ·宏基因组文库概念 | 第11页 |
| ·宏基因组文库的应用 | 第11-12页 |
| ·宏基因组文库技术 | 第12-19页 |
| ·土壤宏基因组文库构建 | 第12-17页 |
| ·文库分析筛选 | 第17-19页 |
| ·宏基因组文库在筛选生物活性物质方面的研究进展 | 第19-20页 |
| ·浙江天目山土壤微生物研究 | 第20-21页 |
| ·天目山独特的自然环境 | 第20-21页 |
| ·天目山土壤微生物研究进展 | 第21页 |
| ·几丁质酶 | 第21-24页 |
| ·几丁质酶概述 | 第21-22页 |
| ·几丁质酶在农业上的应用 | 第22-24页 |
| ·几丁质酶基因的筛选克隆 | 第24页 |
| 2 本课题的研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 3 本课题的研究技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 天目山土壤宏基因组文库构建 | 第26-51页 |
| 1 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·土壤样品 | 第26页 |
| ·菌株、质粒 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·实验仪器 | 第27-28页 |
| ·土壤细菌洗涤液配制 | 第28页 |
| ·提取基因组 DNA 所需溶液 | 第28页 |
| ·文库构建所用溶液 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-40页 |
| ·土壤细菌 DNA 提取与纯化 | 第28-37页 |
| ·土壤分散 | 第28-29页 |
| ·细菌提取 | 第29-30页 |
| ·土壤细菌洗涤 | 第30页 |
| ·提取土壤微生物总 DNA 方法比较 | 第30-31页 |
| ·DNA 质量检测 | 第31-32页 |
| ·土壤宏基因组纯化方法比较 | 第32-35页 |
| ·纯化后土壤宏基因组质量检测 | 第35-37页 |
| ·文库构建 | 第37-39页 |
| ·土壤细菌 DNA 片段酶切及筛选 | 第37页 |
| ·载体制备 | 第37-38页 |
| ·酶切基因组、粘粒载体质量检测 | 第38页 |
| ·连接 | 第38页 |
| ·包装 | 第38-39页 |
| ·滴度测定与转染 | 第39页 |
| ·文库保存 | 第39页 |
| ·文库质量检测 | 第39-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-49页 |
| ·摸索了土壤细菌细胞、DNA 的提取及纯化条件，确定了土壤细菌宏基因组DNA 提取的最佳方法 | 第40-47页 |
| ·天目山土壤细菌宏基因组文库的构建 | 第47-49页 |
| 3 小结 | 第49-51页 |
| 第三章 文库筛选与几丁质酶的基因克隆 | 第51-59页 |
| 1 材料与方法 | 第51-54页 |
| ·材料 | 第51-53页 |
| ·供试菌株、质粒 | 第51页 |
| ·实验仪器设备 | 第51-52页 |
| ·实验所用培养基配制 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-54页 |
| ·几丁质酶活性克隆筛选 | 第53页 |
| ·典型克隆拮抗病原真菌效果测定 | 第53页 |
| ·粘粒测序及几丁质酶基因分析 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·几丁质降解菌株的筛选 | 第54-56页 |
| ·几丁质降解菌株粘粒文库基因分析 | 第56-58页 |
| 3 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第59-61页 |
| 1 结论与讨论 | 第59-60页 |
| 2 下一步工作 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72-73页 |