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胰岛β细胞特异性Ets-1转基因小鼠的鉴定及表型研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第10-12页
材料与方法第12-35页
 1 实验材料第12-15页
   ·仪器设备第12-13页
   ·试剂来源第13-14页
   ·其它第14-15页
 2 研究方法第15-35页
   ·细胞培养第15页
   ·构建PAAV-RIP-Ets-1过表达质粒第15-19页
   ·瞬时转染和表达质粒验证第19-20页
   ·RNA提取和荧光定量RT-PCR检测第20-23页
   ·细胞总蛋白的提取及Western Blot检测第23-26页
   ·转基因小鼠基因型鉴定第26-27页
   ·转基因小鼠基因拷贝数检测第27-28页
   ·免疫荧光第28-31页
   ·胰岛分离和培养第31-33页
   ·GSIS实验和细胞内胰岛素含量抽提第33-34页
   ·动物实验:IPGTT实验和胰岛素注射实验第34页
   ·统计学分析第34-35页
结果第35-48页
 1 转基因质粒的构建及过表达验证第35-36页
 2 转基因小鼠系的建立第36-42页
   ·PCR筛查基因型阳性小鼠第37页
   ·荧光定量PCR检测F1代转基因小鼠胰岛中Ets-1的表达情况第37-38页
   ·绝对定量检测基因拷贝数第38-40页
   ·荧光定量PCR和Western Blot方法检测转基因小鼠胰岛中Ets-1的mRNA和蛋白表达情况第40-41页
   ·免疫荧光观察Ets-1在胰岛β细胞系和转基因小鼠胰岛中的定位情况第41-42页
 3 胰岛B细胞特异性ETS-1转基因小鼠的表型鉴定结果第42-48页
   ·转基因小鼠随年龄增长对胰岛功能的影响第42-43页
   ·转基因小鼠的糖耐量及胰岛素抵抗情况第43-45页
   ·转基因小鼠胰岛中与胰岛β细胞功能相关分子的mRNA水平第45-46页
   ·转基因小鼠原代胰岛的GSIS功能和胰岛素含量第46-48页
分析与讨论第48-51页
小结第51-52页
参考文献第52-57页
综述第57-70页
 参考文献第65-70页
攻读学位期间的文章第70-71页
致谢第71页

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