英文缩略词表 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-12页 |
材料与方法 | 第12-24页 |
1 材料 | 第12-13页 |
·动物、菌株、质粒、细胞 | 第12页 |
·工具酶和试剂 | 第12-13页 |
·主要仪器 | 第13页 |
2 方法 | 第13-24页 |
·六邻体修饰片段的扩增 | 第13-15页 |
·重组腺病毒穿梭质粒载体的构建 | 第15-16页 |
·六邻体修饰片段的酶切和连接反应 | 第15-16页 |
·穿梭质粒的转化 | 第16页 |
·重组腺病毒的构建 | 第16-18页 |
·AD293 细胞培养 | 第16-17页 |
·重组腺病毒的构建和包装 | 第17页 |
·重组腺病毒的构建策略图 | 第17-18页 |
·重组腺病毒六邻体的同源模拟 | 第18页 |
·重组腺病毒热稳定性的检测 | 第18页 |
·重组腺病毒生长特性的检测 | 第18页 |
·flag、his6标签蛋白在六邻体上融合表达的鉴定 | 第18-19页 |
·flag、his6标签蛋白是否暴露在病毒表面的检测 | 第19页 |
·GST 融合蛋白的表达与鉴定 | 第19-22页 |
·BL21 感受态细胞制备(氯化钙法) | 第19页 |
·GST 融合蛋白表达载体的构建 | 第19-21页 |
·GST 融合蛋白的诱导表达 | 第21页 |
·GST 融合蛋白的纯化 | 第21-22页 |
·小鼠免疫 | 第22页 |
·小鼠免疫和采血的时间 | 第22页 |
·小鼠免疫的设计方案 | 第22页 |
·体液免疫反应 | 第22-24页 |
·ELISA 检测抗病毒血清抗体 | 第22-23页 |
·表位鉴定的 ELISA 分析 | 第23-24页 |
结果 | 第24-34页 |
1 重组腺病毒克隆载体的鉴定 | 第24-26页 |
·六邻体修饰片段的 PCR 鉴定 | 第24页 |
·搭桥 PCR 目的片段的鉴定 | 第24-25页 |
·感染性克隆的酶切鉴定 | 第25-26页 |
2 重组腺病毒的包装 | 第26-27页 |
·荧光倒置显微镜观察细胞病变效应 | 第26-27页 |
·重组腺病毒的 PCR 鉴定 | 第27页 |
3 重组腺病毒六邻体结构的同源建模 | 第27-28页 |
4 重组腺病毒热稳定性的检测 | 第28页 |
5 重组腺病毒生长动力学的检测 | 第28-29页 |
6 重组腺病毒 flag、his6 标签蛋白表达的鉴定 | 第29-30页 |
7 flag、his6标签蛋白暴露水平的检测 | 第30页 |
8 体液免疫反应 | 第30-31页 |
9 诱导表位的精确鉴定 | 第31-34页 |
·GST 融合蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第31页 |
·GST 融合片段的氨基酸序列 | 第31-32页 |
·精确鉴定诱导表位的 ELISA 分析 | 第32-34页 |
讨论 | 第34-36页 |
结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
综述 | 第40-49页 |
参考文献 | 第45-49页 |
附录 | 第49-71页 |
致谢 | 第71-72页 |