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井冈霉素发酵过程研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
本论文常用縮略语说明第13-14页
第一章 绪论第14-32页
   ·抗生素发酵研究第14-22页
     ·菌株的选育第14-15页
     ·培养基的优化第15-18页
     ·发酵条件的优化第18-20页
     ·环境压力对抗生素产量的影响第20-22页
   ·井冈霉素研究第22-30页
     ·农用抗生素简介第23页
     ·井冈霉素的发现及应用第23-26页
     ·井冈霉素生物合成研究第26-28页
       ·井冈霉素生物合成基因簇的克隆第26页
       ·生物合成途径的验证第26-28页
     ·井冈霉素发酵研究第28-30页
       ·菌种选育与培养基优化第28-29页
       ·发酵条件对井冈霉素发酵产量的影响第29-30页
   ·本研究的目的内容与意义第30页
   ·本论文主要研究内容第30-32页
第二章 统计学方法优化井冈霉素发酵培养基第32-59页
   ·前言第32页
   ·材料与方法第32-45页
     ·实验材料第32-37页
       ·主要实验试剂及仪器第32-35页
       ·实验菌株第35页
       ·培养基及培养条件第35-37页
     ·井冈霉素发酵过程参数的测定第37-39页
       ·总糖的测定第37页
       ·胞内可溶性蛋白的测定第37-39页
       ·井冈霉素的测定第39页
     ·基因转录水平的测定第39-44页
       ·RNA提取,去DNA及反转录第39-42页
       ·荧光定量PCR引物的验证第42页
       ·转录水平的检测第42-44页
     ·井冈霉素合成相关酶活的检测第44-45页
       ·6磷酸葡萄糖脱氢酶酶活的测定第44页
       ·ValG糖基转移酶酶活的测定第44-45页
   ·结果与讨论第45-57页
     ·单因子实验及Plackett-Burman设计筛选培养基组分中的关键因子第45-46页
     ·Box-Behnken设计及响应面分析第46-50页
     ·优化培养基的验证第50-54页
     ·不同氮源添加对井冈霉素产量的影响第54页
     ·培养基组分对井冈霉素相关基因转录的影响第54-55页
     ·培养基组分对井冈霉素相关酶活的影响第55页
     ·芳香族氨基酸添加对井冈霉素的影响第55-57页
   ·小结第57-59页
第三章 过氧化氢诱导的活性氧提高井冈霉素产量的研究第59-73页
   ·前言第59-60页
   ·材料与方法第60-63页
     ·实验材料第60-61页
       ·主要实验试剂及仪器第60-61页
       ·实验菌株第61页
       ·培养基及培养条件第61页
       ·过氧化氢的添加第61页
     ·井冈霉素发酵过程参数的测定第61-62页
     ·细胞内过氧化氢浓度的测定第62页
     ·胞内总活性氧的测定第62页
     ·基因转录水平的检测第62-63页
       ·RNA提取及逆转录第62页
       ·转录水平的检测第62-63页
     ·井冈霉素合成相关酶活的检测第63页
       ·6磷酸葡萄糖脱氢酶酶活的测定第63页
       ·3磷酸甘油醛脱氢酶酶活的测定第63页
   ·结果与讨论第63-72页
     ·过氧化氢添加时间和浓度的优化第63-65页
     ·过氧化氢诱导的活性氧对井冈霉素产量的影响第65-67页
     ·活性氧的诱导对井冈霉素结构基因转录水平的影响第67-68页
     ·活性氧的诱导对井冈霉素基因簇中氧化还原酶转录水平影响第68-69页
     ·活性氧的诱导对井冈霉素合成相关酶活的影响第69-72页
   ·小结第72-73页
第四章 温度迁移对井冈霉素发酵产量的影响第73-87页
   ·前言第73页
   ·材料与方法第73-76页
     ·实验材料第73-75页
       ·主要实验试剂及仪器第73-74页
       ·实验菌株第74页
       ·培养基及培养条件第74-75页
       ·发酵温度的优化第75页
     ·井冈霉素发酵过程参数的测定第75页
     ·基因转录水平的检测第75-76页
       ·RNA提取及逆转录第75页
       ·转录水平的检测第75-76页
     ·井冈霉素合成相关酶活的检测第76页
   ·结果与讨论第76-86页
     ·高温对吸水链霉菌5008细胞生长和井冈霉素发酵产量的影响第76页
     ·温度迁移对井冈霉素产量的影响第76-79页
     ·温度迁移对井冈霉素结构基因转录及相关酶活的影响第79-81页
     ·活性氧在温度迁移中的作用第81-83页
     ·SigmaB、SigmaH及PhoRP在不同温度条件下转录水平的变化第83-86页
   ·小结第86-87页
第五章 结论与展望第87-90页
   ·结论第87-88页
     ·井冈霉素发酵培养基的优化第87页
     ·过氧化氢的添加对井冈霉素发酵的影响第87-88页
     ·温度迁移对井冈霉素发酵的影响第88页
   ·创新点第88页
   ·展望第88-90页
参考文献第90-103页
附录第103-116页
攻读博士期间撰写的论文及专利第116-118页
致谢第118页

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