| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| ·结核病概述 | 第11-13页 |
| ·结核病的流行病学 | 第11-12页 |
| ·结核病的防治现状 | 第12-13页 |
| ·结核分枝杆菌概述 | 第13-16页 |
| ·结核分枝杆菌病原学及生物学特性 | 第13页 |
| ·结核病肉芽肿形成机制 | 第13-15页 |
| ·结核分枝杆菌和巨噬细胞的相互作用研究 | 第15-16页 |
| ·结核分枝杆菌的毒力因子 | 第16-17页 |
| ·结核分枝杆菌PE/PPE家族蛋白 | 第17-18页 |
| ·Rv3802c蛋白的研究进展 | 第18-19页 |
| ·研究背景、目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 稳定表达结核分枝杆菌Rv3802c的RAW264.7细胞系的构建 | 第20-42页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·细胞、质粒及菌种 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要实验仪器 | 第20-21页 |
| ·培养基及缓冲液配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-33页 |
| ·Rv3802c蛋白相关性质的预测 | 第22页 |
| ·pC3.1-3LHF和pC3.1-3SHF载体的构建及鉴定 | 第22-26页 |
| ·双顺反子重组质粒的构建及鉴定 | 第26-28页 |
| ·转染用质粒的制备 | 第28页 |
| ·CHO、RAW264.7细胞的瞬时转染及IFA鉴定 | 第28-29页 |
| ·CHO细胞内目的蛋白表达的WB检测 | 第29-30页 |
| ·稳定转染用质粒的制备 | 第30页 |
| ·G418工作浓度的确定 | 第30页 |
| ·RAW264.7细胞的稳定转染及荧光检测 | 第30页 |
| ·转染细胞RAW264.7的筛选与单克隆化 | 第30-31页 |
| ·流式细胞术检测RFP的表达稳定性 | 第31页 |
| ·基因组PCR检测 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·细胞系S1的间接免疫荧光鉴定 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-40页 |
| ·Rv3802c基本理化性质分析 | 第33-34页 |
| ·Rv3802c信号肽预测结果 | 第34页 |
| ·重叠延伸PCR扩增结果 | 第34页 |
| ·重组质粒pC3.1-3LHF、pC3.1-3SHF的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·pC3.1-3LHF-Red、pC3.1-3SHF-Red的构建及鉴定 | 第35页 |
| ·瞬时转染的CHO及RAW264.7细胞的IFA鉴定分析 | 第35-36页 |
| ·瞬时转染CHO细胞的蛋白表达分析 | 第36-37页 |
| ·G418工作浓度的确定 | 第37页 |
| ·稳定转染的RAW264.7细胞的筛选及单克隆化 | 第37页 |
| ·流式细胞术检测S1细胞系RFP的表达稳定性 | 第37-38页 |
| ·抗性细胞系的基因组PCR检测 | 第38-39页 |
| ·抗性细胞系的RT-PCR检测 | 第39页 |
| ·细胞系S1的间接免疫荧光结果 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简历 | 第50页 |
