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四种微孢子虫差异蛋白组学分析及NbSwp7原核表达

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第1章 绪论第16-28页
   ·研究背景及意义第16-17页
     ·研究背景第16页
     ·研究意义第16-17页
   ·微孢子虫的研究进展第17-21页
     ·微孢子虫的超微结构第17-18页
     ·微孢子虫的生活史第18-19页
     ·微孢子虫的侵染模式第19-20页
     ·微孢子虫在生物防治上的应用第20-21页
   ·微孢子虫蛋白的研究进展第21-23页
     ·微孢子虫蛋白提取方法的研究第21-22页
     ·微孢子虫蛋白的研究现状第22-23页
   ·蛋白质组学的研究及应用第23-25页
     ·蛋白质分离技术的研究第23-24页
     ·蛋白质的鉴定分析第24页
     ·蛋白质组生物信息学第24-25页
     ·蛋白质组学的应用第25页
   ·原核表达第25-28页
第2章 家蚕微孢子虫与其它三种微孢子虫差异蛋白组学分析第28-52页
   ·实验材料第28-31页
     ·供试病原第28页
     ·主要实验仪器第28页
     ·主要实验试剂配制第28-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·微孢子虫的收集与纯化第31页
     ·微孢子虫总蛋白的提取第31-32页
     ·样品蛋白浓度的测定第32页
     ·蛋白双向电泳第32-33页
     ·凝胶图像扫描与分析第33页
     ·差异蛋白点质谱鉴定第33-34页
   ·结果与分析第34-47页
     ·2-DE 电泳图谱分析第34-35页
     ·差异蛋白点的质谱分析第35-47页
   ·讨论第47-52页
第3章 家蚕微孢子虫 Swp7 的原核表达第52-66页
   ·实验材料第52-55页
     ·供试病原第52页
     ·主要实验仪器第52页
     ·主要实验试剂配制第52-55页
   ·实验方法第55-62页
     ·家蚕微孢子虫的收集与纯化第55页
     ·家蚕微孢子虫基因组的提取第55-56页
     ·引物设计第56页
     ·目的基因的扩增第56页
     ·琼脂糖凝胶电泳第56-57页
     ·扩增产物的回收第57页
     ·目的片段连接于克隆载体第57页
     ·克隆重组质粒的转化第57-58页
     ·克隆筛选与验证第58页
     ·克隆质粒抽提第58-59页
     ·表达载体与克隆质粒的酶切第59页
     ·表达重组质粒的构建第59-60页
     ·表达重组质粒的扩增转化第60页
     ·表达重组质粒的抽提第60页
     ·表达重组质粒的酶切检测第60页
     ·诱导表达第60-61页
     ·SDS-PAGE 检测第61-62页
     ·Western blot第62页
   ·结果与分析第62-65页
     ·家蚕微孢子虫 Swp7 基因 PCR第62-63页
     ·重组克隆质粒的菌液 PCR 鉴定第63页
     ·表达质粒 PET-30a 与重组克隆质粒双酶切第63-64页
     ·表达重组质粒的酶切检测第64页
     ·SDS-PAGE 检测第64页
     ·Western blot 检测第64-65页
   ·讨论第65-66页
结论第66-68页
参考文献第68-76页
附录 1 家蚕微孢子虫 Swp7 氨基酸序列(B3STP1.1)第76-78页
附录 2 家蚕微孢子虫 Swp7 基因序列(EF683107.1)第78-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80-82页
致谢第82页

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