摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第1章 绪论 | 第16-28页 |
·研究背景及意义 | 第16-17页 |
·研究背景 | 第16页 |
·研究意义 | 第16-17页 |
·微孢子虫的研究进展 | 第17-21页 |
·微孢子虫的超微结构 | 第17-18页 |
·微孢子虫的生活史 | 第18-19页 |
·微孢子虫的侵染模式 | 第19-20页 |
·微孢子虫在生物防治上的应用 | 第20-21页 |
·微孢子虫蛋白的研究进展 | 第21-23页 |
·微孢子虫蛋白提取方法的研究 | 第21-22页 |
·微孢子虫蛋白的研究现状 | 第22-23页 |
·蛋白质组学的研究及应用 | 第23-25页 |
·蛋白质分离技术的研究 | 第23-24页 |
·蛋白质的鉴定分析 | 第24页 |
·蛋白质组生物信息学 | 第24-25页 |
·蛋白质组学的应用 | 第25页 |
·原核表达 | 第25-28页 |
第2章 家蚕微孢子虫与其它三种微孢子虫差异蛋白组学分析 | 第28-52页 |
·实验材料 | 第28-31页 |
·供试病原 | 第28页 |
·主要实验仪器 | 第28页 |
·主要实验试剂配制 | 第28-31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·微孢子虫的收集与纯化 | 第31页 |
·微孢子虫总蛋白的提取 | 第31-32页 |
·样品蛋白浓度的测定 | 第32页 |
·蛋白双向电泳 | 第32-33页 |
·凝胶图像扫描与分析 | 第33页 |
·差异蛋白点质谱鉴定 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-47页 |
·2-DE 电泳图谱分析 | 第34-35页 |
·差异蛋白点的质谱分析 | 第35-47页 |
·讨论 | 第47-52页 |
第3章 家蚕微孢子虫 Swp7 的原核表达 | 第52-66页 |
·实验材料 | 第52-55页 |
·供试病原 | 第52页 |
·主要实验仪器 | 第52页 |
·主要实验试剂配制 | 第52-55页 |
·实验方法 | 第55-62页 |
·家蚕微孢子虫的收集与纯化 | 第55页 |
·家蚕微孢子虫基因组的提取 | 第55-56页 |
·引物设计 | 第56页 |
·目的基因的扩增 | 第56页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第56-57页 |
·扩增产物的回收 | 第57页 |
·目的片段连接于克隆载体 | 第57页 |
·克隆重组质粒的转化 | 第57-58页 |
·克隆筛选与验证 | 第58页 |
·克隆质粒抽提 | 第58-59页 |
·表达载体与克隆质粒的酶切 | 第59页 |
·表达重组质粒的构建 | 第59-60页 |
·表达重组质粒的扩增转化 | 第60页 |
·表达重组质粒的抽提 | 第60页 |
·表达重组质粒的酶切检测 | 第60页 |
·诱导表达 | 第60-61页 |
·SDS-PAGE 检测 | 第61-62页 |
·Western blot | 第62页 |
·结果与分析 | 第62-65页 |
·家蚕微孢子虫 Swp7 基因 PCR | 第62-63页 |
·重组克隆质粒的菌液 PCR 鉴定 | 第63页 |
·表达质粒 PET-30a 与重组克隆质粒双酶切 | 第63-64页 |
·表达重组质粒的酶切检测 | 第64页 |
·SDS-PAGE 检测 | 第64页 |
·Western blot 检测 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-66页 |
结论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
附录 1 家蚕微孢子虫 Swp7 氨基酸序列(B3STP1.1) | 第76-78页 |
附录 2 家蚕微孢子虫 Swp7 基因序列(EF683107.1) | 第78-80页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第80-82页 |
致谢 | 第82页 |