毛细管电泳在药物筛选中的应用和技术开发
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-38页 |
| ·药物筛选 | 第11-16页 |
| ·药物筛选方法 | 第12-15页 |
| ·药物靶点发现 | 第15-16页 |
| ·毛细管电泳在药物筛选中的应用 | 第16-31页 |
| ·毛细管电泳介绍 | 第16-21页 |
| ·毛细管电泳研究分子间相互作用的方法 | 第21-23页 |
| ·亲和毛细管电泳 | 第23-26页 |
| ·配体分离法 | 第26-27页 |
| ·毛细管电泳在药物筛选中的应用 | 第27-31页 |
| ·蛋白质组学研究技术 | 第31-38页 |
| ·二维凝胶电泳 | 第31-34页 |
| ·生物质谱 | 第34-35页 |
| ·凝胶中蛋白质的转移 | 第35-38页 |
| 第二章 压力驱动的亲和毛细管电泳方法的建立 | 第38-53页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·P-ACE原理 | 第38-40页 |
| ·仪器及试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·样品溶液和缓冲液配制 | 第41页 |
| ·电泳操作 | 第41-42页 |
| ·毛细管预处理 | 第41页 |
| ·电泳条件 | 第41页 |
| ·测定电渗流 | 第41-42页 |
| ·测定有效电泳淌度 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-51页 |
| ·传统亲和毛细管电泳方法测定结合常数 | 第42-47页 |
| ·压力驱动的亲和毛细管电泳方法的建立 | 第47-51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第三章 压力驱动的亲和毛细管电泳方法的应用 | 第53-75页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·仪器及试剂 | 第53-54页 |
| ·仪器 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53-54页 |
| ·样品溶液和缓冲液配制 | 第54页 |
| ·电泳操作 | 第54-55页 |
| ·毛细管预处理 | 第54页 |
| ·测定有效电泳淌度 | 第54-55页 |
| ·荧光分光光度法操作 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-72页 |
| ·普罗帕酮和BSA的结合 | 第55-59页 |
| ·其他碱性药物和BSA的结合 | 第59页 |
| ·中性药物与BSA的结合 | 第59-62页 |
| ·酸性药物和BSA的结合 | 第62-66页 |
| ·荧光分光光度法测定蛋白结合 | 第66-72页 |
| ·小结 | 第72-75页 |
| 第四章 基于抗原抗体结合的药物筛选模型的建立 | 第75-93页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·仪器及试剂 | 第76-77页 |
| ·仪器 | 第76页 |
| ·试剂 | 第76-77页 |
| ·样品溶液和缓冲液配制 | 第77页 |
| ·荧光标记和纯化 | 第77页 |
| ·电泳操作 | 第77-78页 |
| ·毛细管预处理 | 第77页 |
| ·电泳条件 | 第77-78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-91页 |
| ·紫外条件下研究抗原和抗体结合特性 | 第79-85页 |
| ·激光诱导荧光条件下建立药物筛选模型 | 第85-91页 |
| ·小结 | 第91-93页 |
| 第五章 凝胶中蛋白质转移方法的开发 | 第93-115页 |
| ·引言 | 第93页 |
| ·转移原理 | 第93-95页 |
| ·仪器及试剂 | 第95-97页 |
| ·仪器 | 第95-96页 |
| ·试剂 | 第96页 |
| ·样品溶液和缓冲液配制 | 第96-97页 |
| ·电泳操作 | 第97-98页 |
| ·SDS-PAGE | 第97页 |
| ·毛细管预处理 | 第97-98页 |
| ·凝胶中蛋白质的毛细管电泳转移步骤 | 第98页 |
| ·结果与讨论 | 第98-114页 |
| ·毛细管电泳转移的可行性 | 第98-99页 |
| ·转移模式的选择 | 第99-101页 |
| ·转移过程中影响因素的考察 | 第101-111页 |
| ·SDS-PAGE中蛋白质条带的转移 | 第111-114页 |
| ·小结 | 第114-115页 |
| 第六章 毛细管固定酶整体柱的制备和评价 | 第115-135页 |
| ·引言 | 第115页 |
| ·仪器及试剂 | 第115-117页 |
| ·仪器 | 第115-116页 |
| ·试剂 | 第116-117页 |
| ·实验步骤 | 第117-118页 |
| ·毛细管整体柱的制备及胰蛋白酶的固定 | 第117页 |
| ·样品溶液和缓冲液配制 | 第117页 |
| ·毛细管电泳条件 | 第117-118页 |
| ·结果与讨论 | 第118-134页 |
| ·整体柱的预处理 | 第119-120页 |
| ·整体柱的评价 | 第120-124页 |
| ·自由酶活性测定 | 第124-128页 |
| ·固定酶整体柱中酶活性的测定 | 第128-134页 |
| ·小节 | 第134-135页 |
| 第七章 在线酶解凝胶中蛋白质方法的初步建立 | 第135-145页 |
| ·引言 | 第135页 |
| ·仪器及试剂 | 第135-136页 |
| ·仪器 | 第135-136页 |
| ·试剂 | 第136页 |
| ·实验步骤 | 第136-137页 |
| ·毛细管整体柱的制备及胰蛋白酶的固定 | 第136-137页 |
| ·样品溶液和缓冲液配制 | 第137页 |
| ·毛细管电泳条件 | 第137页 |
| ·结果与讨论 | 第137-144页 |
| ·BSA溶液的酶解 | 第137-139页 |
| ·一步法酶解凝胶中BSA | 第139-140页 |
| ·两步法酶解凝胶中BSA | 第140-144页 |
| ·小结 | 第144-145页 |
| 第八章 结论与展望 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-165页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第165-167页 |
| 致谢 | 第167页 |
