摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-23页 |
·骨形态发生蛋白家族(BMPs)及其受体的研究应用进展 | 第11-15页 |
·BMPs 家族的发展简史 | 第11页 |
·BMPs 的种类及结构特征 | 第11-12页 |
·BMPs 的受体类型及信号传导途径 | 第12-13页 |
·BMPs 及其受体的生物学功能 | 第13-15页 |
·BMP-2 的研究进展 | 第15-16页 |
·BMP-2 的基因结构 | 第16页 |
·BMP-2 的生物学功能 | 第16页 |
·BMP-4 的研究进展 | 第16-17页 |
·BMP-4 基因结构及基因调控 | 第16-17页 |
·BMP-4 的生物学功能 | 第17页 |
·BMP-4 与哺乳动物繁殖性能的关系 | 第17页 |
·实时荧光定量 PCR 技术 | 第17-22页 |
·实时荧光定量 PCR 原理 | 第18页 |
·荧光定量 PCR 的定量方法 | 第18-19页 |
·实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第19-22页 |
·引言 | 第22-23页 |
2 新西兰白兔 BMP-2 基因和 BMP-4 基因的克隆与生物信息分析 | 第23-45页 |
·试验材料 | 第23-24页 |
·菌株和克隆载体 | 第23页 |
·试验动物组织样 | 第23页 |
·主要仪器和设备 | 第23页 |
·主要试剂和溶液 | 第23-24页 |
·试验方法和步骤 | 第24-31页 |
·PCR 引物设计和合成 | 第24-25页 |
·动物组织总 RNA 的提取 | 第25页 |
·RT-PCR 法扩增 BMP-2 和 BMP-4 部分序列 | 第25-27页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
·cDNA 的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第27-31页 |
·结果 | 第31-35页 |
·总 RNA 的提取结果 | 第31-32页 |
·反转录反应中 18srRNA 的扩增 | 第32页 |
·RT-PCR 扩增结果 | 第32-33页 |
·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第33-34页 |
·RT-PCR 产物的测序 | 第34-35页 |
·新西兰白兔 BMP-2 基因和 BMP-4 基因部分 cDNA 序列的电子克隆 | 第35-43页 |
·电子克隆新西兰白兔 BMP-2 基因 cDNA 序列的生物信息学分析 | 第37-40页 |
·电子克隆新西兰白兔 BMP-4 基因 cDNA 序列的生物信息学分析 | 第40-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
3 新西兰白兔 BMP-2 和 BMP-4 不同组织及不同时期的表达分析 | 第45-61页 |
·材料与方法 | 第45-47页 |
·试验动物和样品准备 | 第45页 |
·主要仪器和试剂 | 第45-46页 |
·RNA 提取和 cDNA 合成 | 第46页 |
·PCR 引物设计与扩增条件优化 | 第46-47页 |
·实时荧光定量 PCR 的表达分析 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-57页 |
·RNA 的纯度与完整性 | 第47-48页 |
·荧光定量 PCR 扩增曲线和溶解曲线 | 第48-50页 |
·新西兰白兔不同发育时期 BMP-2 基因的组织表达研究 | 第50-53页 |
·新西兰白兔不同发育时期 BMP-4 基因的组织表达研究 | 第53-56页 |
·BMP-2 基因和 BMP-4 基因在新西兰白兔不同发育时期的组织表达特点比较 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
·BMP-2 基因组织表达特点和不同时期表达特点的分析 | 第57-58页 |
·BMP-4 基因组织表达特点和不同时期表达特点的分析 | 第58-59页 |
·BMP-2 基因和 BMP-4 基因的组织表达比较分析 | 第59页 |
·小结 | 第59-61页 |
4 结论 | 第61-62页 |
5 创新点及下一步的工作展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |