| 致谢 | 第1-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-13页 |
| ·肠三叶肽 TFF3 分子结构及基因特点 | 第9页 |
| ·肠三叶肽的分布表达及调节因素 | 第9-10页 |
| ·TFF3 粘膜保护作用与作用机制 | 第10-11页 |
| ·TFF3 与粘液糖蛋白的相互作用 | 第10页 |
| ·诱导肠上皮细胞的迁移并促进细胞的增殖 | 第10页 |
| ·具有细胞保护功能 | 第10-11页 |
| ·参与细胞信号的传导 | 第11页 |
| ·TFF3 的研究进展 | 第11-12页 |
| ·胃肠道疾病方面 | 第11页 |
| ·在肿瘤研究方面 | 第11-12页 |
| ·展望 | 第12-13页 |
| 2 引言 | 第13-14页 |
| 3 材料与方法 | 第14-32页 |
| ·试验试剂与仪器 | 第14-18页 |
| ·样品采集 | 第14页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·主要仪器设备 | 第14页 |
| ·主要试剂及配制 | 第14-18页 |
| ·重组表达质粒 pET28a-TFF3 的构建 | 第18-27页 |
| ·猪肠三叶肽 TFF3 基因的克隆 | 第18-20页 |
| ·质粒 pET28a 的改造 | 第20-26页 |
| ·重组表达质粒 pET28a-TFF3 的构建 | 第26-27页 |
| ·重组表达质粒 pET28a-TFF3 转化 E.coli BL21（DE3）pLysS 感受态细胞，IPTG 诱导表达，Western blot 鉴定 | 第27-29页 |
| ·pET28a-TFF3 转化 E.coli BL21（DE3）pLysS 感受态细胞 | 第27页 |
| ·IPTG 诱导表达 | 第27-28页 |
| ·12%SDS-PAGE 鉴定表达结果 | 第28-29页 |
| ·IPTG 最佳诱导条件的优化 | 第29页 |
| ·IPTG 最佳诱导浓度的确定 | 第29页 |
| ·最佳诱导表达时间的确定 | 第29页 |
| ·重组表达蛋白的纯化、透析与浓缩 | 第29-30页 |
| ·大量诱导表达 | 第29-30页 |
| ·蛋白纯化样品的准备 | 第30页 |
| ·重组表达蛋白的纯化 | 第30页 |
| ·透析、浓缩 | 第30页 |
| ·AcTEV 酶酶切重组表达蛋白，Tricine-SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第30-32页 |
| ·AcTEV 酶酶切 | 第30-31页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE 电泳鉴定酶切产物 | 第31-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-43页 |
| ·猪肠三叶肽 TFF3 基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·质粒 pET 28a 的改造 | 第33-38页 |
| ·人 Galectin-1 基因的克隆与纯化 | 第33-34页 |
| ·人 Galectin-1 基因的酶切 | 第34-35页 |
| ·对质粒 pET 28a 进行酶切并连接 | 第35页 |
| ·转化并筛选阳性菌落 | 第35-36页 |
| ·改造质粒 pET 28a | 第36-38页 |
| ·重组表达质粒 pET28a-TFF3 的构建 | 第38页 |
| ·重组表达质粒 pET28a-TFF3 转化 E.coli BL21（DE3）pLysS 感受态细胞，IPTG 诱导表达，Western blot 鉴定 | 第38-41页 |
| ·pET28a-TFF3 转化 E.coli BL21（DE3）pLysS 感受态细胞 | 第38-39页 |
| ·IPTG 诱导表达，12%SDS-PAGE 鉴定表达结果 | 第39-40页 |
| ·Western blot 鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·IPTG 诱导表达条件的优化 | 第41-42页 |
| ·IPTG 最佳诱导浓度的确定 | 第41页 |
| ·最佳诱导表达时间的确定 | 第41-42页 |
| ·重组表达蛋白的纯化、透析与浓缩 | 第42-43页 |
| ·AcTev 蛋白酶进行酶切，Tricine-SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第43页 |
| 5 讨论与结论 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·猪肠三叶肽 TFF3 基因的克隆 | 第43页 |
| ·人 Galectin-1 基因的克隆 | 第43-44页 |
| ·猪肠三叶肽 TFF3 基因的诱导表达和鉴定 | 第44页 |
| ·猪肠三叶肽 TFF3 重组目的蛋白的纯化与浓缩 | 第44-45页 |
| ·AcTev 蛋白酶酶切重组目的蛋白 | 第45页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 英文摘要 | 第50-51页 |
