| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 第一部分 嵌合抗原受体的构建 | 第14-26页 |
| 1 材料 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第15-16页 |
| ·主要培养基及液体试剂的配制 | 第16页 |
| 2 方法 | 第16-23页 |
| ·pCDH-ICOS-CD3ζ载体的构建 | 第16-20页 |
| ·pCDH-EGFRvⅢscFv-ICOS-CAR载体的构建 | 第20-23页 |
| 3 结果 | 第23-24页 |
| ·载体pCDH-ICOS-CD3ζ的鉴定 | 第23页 |
| ·载体EGFRVⅢ CAR的鉴定 | 第23-24页 |
| 4 讨论 | 第24-25页 |
| 5 结论 | 第25-26页 |
| 第二部分 EGFRvⅢ CAR修饰T细胞及体外抗肿瘤实验 | 第26-43页 |
| 1 材料 | 第27-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第27-29页 |
| 2 方法 | 第29-39页 |
| ·慢病毒的包装与鉴定 | 第29-31页 |
| ·人外周血CD3~+T细胞的分离及CAR修饰 | 第31-34页 |
| ·流式细胞仪检测修饰T细胞CAR表达 | 第34页 |
| ·Western blot法检测修饰T细胞CD3ζ表达 | 第34-38页 |
| ·~(51)Cr释放法检测CAR+T细胞的细胞毒性 | 第38页 |
| ·ELISA法检测细胞因子IFN-γ的分泌 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-40页 |
| ·慢病毒的包装与鉴定 | 第39页 |
| ·修饰T细胞表面CAR表达 | 第39-40页 |
| ·修饰T细胞CD3ζ表达 | 第40页 |
| ·修饰T细胞的选择性杀伤作用 | 第40页 |
| ·修饰T细胞的IFN-γ分泌 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 附图 | 第43-46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 综述 | 第48-59页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 英文缩略词表 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简历 | 第62页 |
