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十字花科蔬菜根肿病菌检测技术及畜禽粪便传播病原菌研究

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 引言第14-28页
   ·根肿病的研究概况第14-18页
     ·芸薹根肿菌的分类地位及生活史第14-15页
     ·根肿菌形态及生物学特性第15-16页
     ·根肿菌寄主范围及侵染途径第16-17页
     ·根肿病发病规律及传播途径第17-18页
     ·根肿病的危害第18页
   ·荧光染色技术在植物病原菌活力检测研究中的应用第18-20页
     ·病原菌活性检测技术研究进展第19-20页
     ·荧光染色技术在根肿菌活力检测研究中的应用第20页
   ·PCR 快速检测技术研究进展及应用第20-23页
     ·PCR 快速检测技术研究进展第20-22页
     ·PCR 快速检测技术在根肿菌检测中的应用第22-23页
   ·高温堆肥发酵技术在植物病害防治中的应用第23-25页
     ·高温堆肥发酵技术影响因素第23-24页
     ·高温堆肥技术在植物病害防治中的应用第24-25页
   ·本研究的目的及意义第25-26页
   ·论文主要研究内容和技术路线第26-28页
     ·研究内容第26-27页
     ·技术路线第27-28页
第二章 芸薹根肿菌休眠孢子活力检测技术研究第28-48页
   ·试验材料第28-29页
   ·试验方法第29-33页
   ·结果与分析第33-45页
     ·肿根及土壤中根肿菌休眠孢子的分离与富集第33-34页
     ·荧光染色方法的筛选第34-36页
     ·最佳染色技术参数研究第36-37页
     ·最佳染色技术有效性评价第37-42页
     ·Hoechest33342-PI 复染法应用第42-45页
   ·小结与讨论第45-48页
     ·根肿菌休眠孢子活力检测方法筛选第45页
     ·最佳染色技术参数研究第45页
     ·最佳染色技术有效性评价第45-46页
     ·Hoechst333342-PI 复染法的应用第46-48页
第三章 根肿病菌快速高灵敏性检测技术的建立及应用第48-64页
   ·试验材料第48-50页
   ·试验方法第50-54页
   ·结果与分析第54-62页
     ·病原菌基因组 DNA 的提取第54-55页
     ·芸薹根肿菌 ITS 区序列测定及特异性引物设计第55页
     ·引物特异性检测第55页
     ·荧光定量 PCR 标准品的制备第55-56页
     ·荧光定量 PCR 标准曲线的建立第56-57页
     ·荧光定量 PCR 体系灵敏性及重复性评价第57-59页
     ·荧光定量 PCR 检测技术的应用第59-62页
   ·小结与讨论第62-64页
     ·荧光定量 PCR 检测体系的特异性、灵敏性及重复性评价第62-63页
     ·荧光定量 PCR 检测体系的应用第63-64页
第四章 禽畜粪便传播十字花科蔬菜根肿病菌研究第64-76页
   ·试验材料第64-65页
   ·试验方法第65-67页
   ·结果与分析第67-74页
     ·荧光定量 PCR 检测鸡粪及猪粪中的根肿菌第67-68页
     ·鸡粪及猪粪中根肿菌休眠孢子的分离第68-69页
     ·Hoechest33342-PI 复染法检测根肿菌休眠孢子活力第69-72页
     ·带菌鸡粪和猪粪中根肿菌休眠孢子致病性测定第72-74页
   ·小结与讨论第74-76页
     ·鸡粪及猪粪中根肿菌的荧光定量 PCR 检测第74-75页
     ·鸡粪及猪粪中根肿菌休眠孢子活力及致病力评价第75-76页
第五章 模拟畜禽消化道环境对根肿菌活力影响研究第76-83页
   ·试验材料第76页
   ·试验方法第76-78页
   ·结果与分析第78-81页
     ·根肿菌休眠孢子耐热性评价第78-79页
     ·根肿菌休眠孢子耐酸性评价第79-80页
     ·根肿菌休眠孢子耐胆盐性评价第80-81页
     ·体外模拟处理后根肿菌休眠孢子致病力评价第81页
   ·小结与讨论第81-83页
     ·根肿菌休眠孢子具有很强的耐热性第81-82页
     ·根肿菌休眠孢子对强酸和高胆盐浓度具有很强的耐受性第82-83页
第六章 带菌猪粪中根肿菌无害化处理技术研究第83-94页
   ·试验材料第83-84页
   ·试验方法第84-85页
   ·结果与分析第85-91页
     ·堆体温度、氧浓度、水分变化第85-88页
     ·高温堆肥 pH 值和电导率(EC)的变化第88-89页
     ·高温堆肥腐熟度指标参数测试及分析方法第89-90页
     ·高温堆肥对根肿菌灭杀效果评价第90-91页
   ·小结与讨论第91-94页
     ·堆体温度和水分变化对根肿菌休眠孢子活力影响第91-92页
     ·堆体 pH 值对根肿菌休眠孢子活力影响第92页
     ·堆体腐熟度评价第92-93页
     ·高温堆肥对根肿菌灭杀效果第93-94页
第七章 结论与讨论第94-103页
   ·全文结论第94-96页
     ·创建了根肿菌休眠孢子荧光双染新技术第94页
     ·建立了根肿病菌快速高灵敏性检测技术第94-95页
     ·畜禽粪便是十字花科蔬菜根肿病传播途径之一第95页
     ·初步明确了畜禽消化道环境对根肿菌休眠孢子活力的影响第95页
     ·实现了带菌猪粪中根肿菌休眠孢子的无害化处理第95-96页
   ·讨论第96-101页
     ·十字花科蔬菜根肿病防控中存在的问题第96-97页
     ·根肿菌休眠孢子活力检测技术研究第97-98页
     ·根肿菌荧光定量 PCR 检测技术的应用第98-99页
     ·畜禽粪便带菌是根肿病大面积暴发与流行的重要原因第99-101页
     ·猪粪中根肿菌无害化处理技术研究第101页
   ·论文创新点第101-102页
   ·展望第102-103页
参考文献第103-115页
致谢第115-116页
作者简历第116页

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