| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩写名词表 | 第11-12页 |
| 1 综述 | 第12-24页 |
| ·干旱胁迫对植物的影响 | 第12页 |
| ·植物抗旱研究的生理基础 | 第12-13页 |
| ·干旱条件下植物抗逆性评价指标的鉴定 | 第13-14页 |
| ·与干旱相关的信号途径和干旱胁迫应答基因的研究进展 | 第14-20页 |
| ·干旱胁迫下ABA信号转导途径 | 第14-15页 |
| ·逆境胁迫下ABA信号途径中SDIR1介导的抗旱 | 第15-16页 |
| ·内质网分子伴侣在干旱胁迫中的作用 | 第16页 |
| ·热激蛋白Hsp70的研究进展 | 第16-18页 |
| ·胁迫相关分子伴侣BiP的研究进展 | 第18页 |
| ·逆境胁迫下的未折叠蛋白质途径 | 第18-19页 |
| ·逆境胁迫下的细胞凋亡NRP信号途径 | 第19-20页 |
| ·生物信息学技术在基因功能预测方面的分析 | 第20页 |
| ·酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system) | 第20-21页 |
| ·转基因技术研究 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第21页 |
| ·转基因的分子检测技术 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-35页 |
| ·植物受体材料 | 第24页 |
| ·载体和试剂 | 第24页 |
| ·甘蓝型油菜BnBiP基因的克隆与分离 | 第24-26页 |
| ·BnBiP基因表达材料的准备 | 第24页 |
| ·总RNA的抽提 | 第24页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR | 第25-26页 |
| ·Gene RACE方法获得BnBiP的全长cDNA | 第26页 |
| ·RACE产物的克隆及测序 | 第26页 |
| ·基于生物信息学BnBiP基因的同源性分析及功能预测 | 第26-27页 |
| ·遗传转化载体的构建 | 第27页 |
| ·农杆菌介导的甘蓝型油菜的转化 | 第27-29页 |
| ·遗传转化受体材料的准备 | 第28页 |
| ·农杆菌的培养与侵染 | 第28页 |
| ·选择培养 | 第28页 |
| ·诱导愈伤培、出芽和芽延长 | 第28页 |
| ·诱导生根、壮苗和移栽 | 第28-29页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第29-30页 |
| ·PCR检测 | 第29页 |
| ·RT-PCR分析 | 第29页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第29-30页 |
| ·酵母细胞中的生化实验 | 第30-31页 |
| ·酵母双杂交载体的构建 | 第30页 |
| ·酵母菌的快速转化 | 第30-31页 |
| ·酵母双杂交检测BnBiP与BnSDIR1之间的互作 | 第31页 |
| ·PEG胁迫条件对转基因植株的影响 | 第31-33页 |
| ·PEG胁迫条件下BnBiP基因及叶片衰老相关基因的表达 | 第31-32页 |
| ·PEG胁迫条件下转基因植株生理生化实验 | 第32-33页 |
| ·衣霉素胁迫条件对转基因植株的影响 | 第33-34页 |
| ·BnBiP超表达甘蓝型油菜T_0代种子在衣霉素胁迫下发芽实验 | 第33页 |
| ·BnBiP超表达甘蓝型油菜T_1代幼苗在衣霉素胁迫下表现 | 第33-34页 |
| ·BnBiP超表达甘蓝型油菜T_1代土培苗干旱胁迫实验 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-55页 |
| ·BnBiP的克隆与分离 | 第35-40页 |
| ·甘蓝型油菜BnBiP的表达特征 | 第35页 |
| ·BnBiP序列的克隆 | 第35-36页 |
| ·基因的同源性分析和功能预测 | 第36-40页 |
| ·遗传转化 | 第40-43页 |
| ·遗传转化载体的构建 | 第40页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第40-41页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第41-43页 |
| ·衣霉素胁迫下转基因植株抗性检测 | 第43-48页 |
| ·BnBiP超表达甘蓝型油菜T_0代种子在衣霉素胁迫下发芽实验 | 第43-46页 |
| ·BnBiP超量表达T_1代转基因幼苗在衣霉素胁迫下表现 | 第46-48页 |
| ·转基因植株的抗旱性鉴定 | 第48-55页 |
| ·T_1代转基因植株对PEG胁迫的抗性检测 | 第48-49页 |
| ·T_1代转基因植株土培苗的抗旱性鉴定 | 第49页 |
| ·BnBiP与ABA信号途径的BnSDIR1基因的互作分析 | 第49-50页 |
| ·PEG胁迫下BnBiP及衰老相关基因的表达 | 第50-52页 |
| ·转基因植株在PEG胁迫条件下相关生理生化指标的变化 | 第52-55页 |
| 4 讨论 | 第55-64页 |
| ·BnBiP基因功能的探讨 | 第55-59页 |
| ·BnBiP基因是一个干旱胁迫相关基因 | 第55-56页 |
| ·BnBiP对衣霉素胁迫抗性 | 第56-57页 |
| ·BnBiP与NRP信号途径 | 第57-58页 |
| ·BnBiP提高植株抗旱性的几种可能抗旱途径 | 第58-59页 |
| ·关于甘蓝型油菜抗旱性鉴定指标的探讨 | 第59-61页 |
| ·BnBiP介导的抗逆途径与ABA信号转导途径及其他信号途径的关系 | 第61-62页 |
| ·关于后续工作的设想 | 第62-64页 |
| ·BnBiP在甘蓝型油菜中的亚细胞定位 | 第62页 |
| ·BnBiP基因在甘蓝型油菜中的抑制表达 | 第62页 |
| ·转基因甘蓝型油菜的田间抗旱鉴定 | 第62页 |
| ·甘蓝型油菜抗旱性鉴定指标的筛选与体系的建立 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 附录 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
