| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-27页 |
| ·DMSP的生物学功能 | 第10-11页 |
| ·DMSP代谢途径中的相关功能基因 | 第11-24页 |
| ·DMSP去甲基化降解途径及关键功能基因 | 第13-14页 |
| ·产DMS降解途径及关键功能基因 | 第14-21页 |
| ·DMSP分解代谢中的辅助功能基因 | 第21-24页 |
| ·研究目的和意义 | 第24-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-42页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·基因组DNA的部分酶切及回收 | 第30-32页 |
| ·载体的制备 | 第32-33页 |
| ·DNA连接反应 | 第33页 |
| ·连接产物的包装 | 第33-34页 |
| ·包装产物的侵染 | 第34页 |
| ·文库的质量分析 | 第34页 |
| ·文库的保存 | 第34-35页 |
| ·文库的筛选 | 第35页 |
| ·B22-1的抗生素抗性分折 | 第35-36页 |
| ·三亲本接合转移 | 第36页 |
| ·无DMSP代谢能力的突变株的筛选 | 第36-37页 |
| ·不同碳源条件下突变株生长比较测定 | 第37页 |
| ·热不对称交错PCR(TAIL-PCR) | 第37-40页 |
| ·核酸及蛋白质序列分析 | 第40页 |
| ·功能互补 | 第40页 |
| ·荧光定量PCR | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-59页 |
| ·假单胞菌B22-1全基因组COSM-文库的构建及筛选 | 第43-47页 |
| ·总DNA的质量检测 | 第43-44页 |
| ·部分酶切条件的优化 | 第44-45页 |
| ·片段的回收及定量检测 | 第45-46页 |
| ·文库的保存及质量分析 | 第46-47页 |
| ·文库的筛选 | 第47页 |
| ·假单胞菌B22-1突变库的构建、筛选及功能基因鉴定 | 第47-59页 |
| ·抗生素抗性分析及突变体库构建 | 第48-49页 |
| ·突变株的筛选及产DMS能力的测定 | 第49-50页 |
| ·突变株在不同碳源条件下的生长比较测定 | 第50-51页 |
| ·Tn5侧翼序列的获得 | 第51-54页 |
| ·功能基因全长序列的克隆及比对分析 | 第54-55页 |
| ·mqo基因的功能互补 | 第55-57页 |
| ·mqo基因在不同碳源条件下的表达特性 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |