| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·前言 | 第12页 |
| ·鱼类的性腺分化及发育 | 第12-13页 |
| ·鱼类性别决定机制 | 第13-15页 |
| ·遗传型性别决定 | 第14-15页 |
| ·环境型性别决定 | 第15页 |
| ·鱼类性腺决定及分化相关基因 | 第15-22页 |
| ·amh | 第16-17页 |
| ·cyp19a | 第17-18页 |
| ·dax1 | 第18-19页 |
| ·dmrt 基因家族 | 第19-20页 |
| ·ftz-f1 | 第20-21页 |
| ·foxl2 | 第21页 |
| ·sox 基因家族 | 第21-22页 |
| ·实验材料的选择 | 第22页 |
| ·本文研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 彭泽鲫 amh、cyp19a1a 和 dax1 的全长 cDNA 克隆与表达 | 第24-51页 |
| ·实验材料与试剂 | 第24-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第24-25页 |
| ·主要实验试剂 | 第25页 |
| ·主要实验溶液及配制方法 | 第25页 |
| ·实验用鱼及其组织样品 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·目的基因中间片段的克隆 | 第26-28页 |
| ·amh、cyp19a1a 和 dax1 基因的 cDNA 末端序列的快速扩增 | 第28-30页 |
| ·DNA 片段的纯化回收 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30-31页 |
| ·连接产物的转化实验 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第32页 |
| ·测序及生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·实时定量 PCR | 第33页 |
| ·内参基因的筛选 | 第33-34页 |
| ·实时定量 PCR 检测 amh、cyp19a1a 和 dax1 基因的组织表达 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-48页 |
| ·总 RNA 的质量检测 | 第34-35页 |
| ·彭泽鲫 amh、cyp19a1a 和 dax1 基因的全长 cDNA 克隆 | 第35-36页 |
| ·彭泽鲫 amh、cyp19a1a 和 dax1 基因全长 cDNA 的序列分析 | 第36-46页 |
| ·组织表达实验中最稳定内参基因筛选的结果及分析 | 第46-47页 |
| ·彭泽鲫 amh、cyp19a1a 和 dax1 基因的组织表达结果及分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·彭泽鲫 amh、cyp19a1a 和 dax1 基因结构与功能之间的关系 | 第48-49页 |
| ·彭泽鲫 amh、cyp19a1a 和 dax1 基因的组织分布与其功能的关系 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-51页 |
| 第三章 amh、cyp19a1a 和 dax1 在彭泽鲫幼鱼不同发育阶段中的 mRNA 表达变化 | 第51-55页 |
| ·材料与试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·实验用鱼 | 第51页 |
| ·实验设计 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·总 RNA 的提取及反转录生成第一链 cDNA | 第51-52页 |
| ·实时定量 PCR | 第52页 |
| ·内参基因的筛选 | 第52页 |
| ·数据分析 | 第52页 |
| ·内参基因筛选结果及分析 | 第52页 |
| ·目的基因在彭泽鲫幼鱼不同发育阶段中表达变化的结果与分析 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 甲基睾丸酮对 amh、cyp19a1a 和 dax1 在彭泽鲫幼鱼中 mRNA 的表达影响 | 第55-61页 |
| ·材料与试剂 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·实验用鱼 | 第55页 |
| ·MT 对彭泽鲫幼鱼的暴露实验 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56页 |
| ·总 RNA 的提取及反转录实验 | 第56页 |
| ·实时定量 PCR | 第56页 |
| ·内参基因的筛选 | 第56页 |
| ·数据分析 | 第56页 |
| ·内参基因筛选结果及分析 | 第56页 |
| ·MT 对 amh、cyp19a1a 和 dax1 基因表达影响的结果与分析 | 第56-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
| 附录 | 第74-77页 |
| 缩略词 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
