高表达抗EGFR单克隆抗体的细胞株构建
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-17页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·EGFR 的生物学活性 | 第13-15页 |
| ·CETUXIMAB 的作用机制 | 第15页 |
| ·调节细胞周期 | 第15页 |
| ·抑制血管生成及转移 | 第15页 |
| ·促进细胞凋亡 | 第15页 |
| ·本课题研究的主要内容 | 第15-17页 |
| ·细胞系选择 | 第15-16页 |
| ·高表达细胞株筛选 | 第16-17页 |
| 第二章 试验材料、方法 | 第17-30页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·试验仪器设备 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18-21页 |
| ·细胞培养试剂 | 第18页 |
| ·分子试剂 | 第18-19页 |
| ·ELISA 试剂 | 第19-20页 |
| ·电泳试剂 | 第20-21页 |
| ·试验方法 | 第21-30页 |
| ·质粒构建 | 第21-24页 |
| ·转染方法建立 | 第24-25页 |
| ·瞬时转染 | 第25页 |
| ·G418 杀伤曲线 | 第25页 |
| ·稳定高表达细胞系筛选 | 第25-26页 |
| ·MTX 加压筛 | 第26页 |
| ·亚克隆 | 第26页 |
| ·稳定性鉴定 | 第26-27页 |
| ·癌细胞生长抑制试验 | 第27页 |
| ·Elisa 检测蛋白表达 | 第27页 |
| ·细胞计数 | 第27-28页 |
| ·细胞传代方法 | 第28页 |
| ·细胞冻存 | 第28页 |
| ·Western 检测蛋白的表达 | 第28-29页 |
| ·批次培养 | 第29-30页 |
| 第三章 实验结果 | 第30-44页 |
| ·质粒构建 | 第30-31页 |
| ·轻重链扩增 | 第30页 |
| ·目的基因连接载体 | 第30-31页 |
| ·酶切鉴定 | 第31页 |
| ·质粒提取 | 第31页 |
| ·转染方法 | 第31-34页 |
| ·瞬时转染 | 第34页 |
| ·ELISA 结果 | 第34页 |
| ·WB 结果 | 第34页 |
| ·G418 杀伤曲线 | 第34-35页 |
| ·稳定高表达细胞系筛选 | 第35-37页 |
| ·细胞株构建 | 第35-37页 |
| ·MTX 加压筛选 | 第37-38页 |
| ·批次培养 | 第38-39页 |
| ·亚克隆 | 第39页 |
| ·稳定性鉴定 | 第39-41页 |
| ·ANTI-EGFR-355#-6 批次培养 | 第41页 |
| ·SDS-PAGE | 第41-42页 |
| ·癌细胞抑制实验 | 第42-44页 |
| 第四章 结论讨论 | 第44-48页 |
| ·结果总结 | 第44页 |
| ·治疗性单克隆抗体研究进展及临床应用现状 | 第44-46页 |
| ·鼠抗体的人源化改造 | 第44-46页 |
| ·人源性抗体 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52页 |
