| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 縮略词 | 第15-17页 |
| 引言 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-36页 |
| 1 菊花氮素营养生理 | 第18-19页 |
| 2 植物硝态氮跨膜运输机制 | 第19-28页 |
| ·植物低亲和硝酸盐转运蛋白基因鉴定 | 第20-24页 |
| ·植物高亲和硝酸盐转运蛋白基因鉴定 | 第24-25页 |
| ·植物硝态氮运输的双组份系统 | 第25页 |
| ·植物硝态氮运输蛋白基因的调控 | 第25-28页 |
| 3 基因克隆及启动子克隆技术及其应用 | 第28-32页 |
| ·RACE技术及其应用 | 第28-29页 |
| ·TAIL-PCR技术及其应用 | 第29-31页 |
| ·Anchored PCR技术及其应用 | 第31-32页 |
| 4 蛋白间互作研究系统及其应用 | 第32-36页 |
| ·Split-ubiquitin系统及其应用 | 第32-34页 |
| ·BiFC系统及其应用 | 第34-36页 |
| 第二章 切花菊氮高效品种苗期筛选 | 第36-44页 |
| 摘要 | 第36-37页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·试验设计 | 第37-38页 |
| ·测定方法 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-41页 |
| 3 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 菊花CmNRT基因的克隆与序列分析 | 第44-74页 |
| 第一节 菊花CmNRT2基因的克隆及序列分析 | 第44-63页 |
| 摘要 | 第44-45页 |
| 1 材料与方法 | 第45-52页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·试剂与仪器 | 第45-48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-62页 |
| ·RNA提取质量与反转录效果检测 | 第52-53页 |
| ·菊花CmNRT2.1和CmNRT2.4基因的克隆 | 第53-54页 |
| ·菊花CmNRT2.1和CmNRT2.4基因的序列分析 | 第54-56页 |
| ·菊花CmNRT2.1和CmNRT2.4基因氨基酸序列与拟南芥AtNRT2基因家族同源性比对 | 第56页 |
| ·菊花CmNRT2基因家族的获得 | 第56-57页 |
| ·菊花CmNRT2基因家族序列分析 | 第57-59页 |
| ·菊花CmNRT2基因家族氨基酸序列同源性比对及聚类分析 | 第59-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| 第二节 菊花CmNRT1基因和CmNAR2基因的克隆 | 第63-74页 |
| 摘要 | 第63页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| ·植物材料 | 第63页 |
| ·试剂与仪器 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-71页 |
| ·菊花CmNRT1.1和CmNAR2.1基因的克隆 | 第65-67页 |
| ·菊花CmNRT1.1和CmNAR2.1基因的序列分析 | 第67页 |
| ·菊花CmNRT1.1基因氨基酸序列同源性比对及聚类分析 | 第67-69页 |
| ·菊花CmNAR2.1基因氨基酸序列同源性比对及聚类分析 | 第69-71页 |
| 3 讨论 | 第71-74页 |
| 第四章 菊花CmNRT基因启动子克隆及功能元件分析 | 第74-86页 |
| 摘要 | 第74-75页 |
| 1 材料与方法 | 第75-78页 |
| ·植物材料 | 第75页 |
| ·试剂与仪器 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-84页 |
| ·CmNRT基因的启动子序列克隆 | 第78-79页 |
| ·CmNRT基因的启动子元件预测分析 | 第79-84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 第五章 菊花CmNRT基因的表达特性 | 第86-100页 |
| 第一节 菊花常用内参基因实时荧光定量PCR表达稳定性评价 | 第86-93页 |
| 摘要 | 第86页 |
| 1 材料和方法 | 第86-90页 |
| ·植物材料 | 第86-87页 |
| ·试剂和仪器 | 第87页 |
| ·实验方法 | 第87-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-93页 |
| 第二节 菊花CmNRT基因的表达特性分析 | 第93-100页 |
| 摘要 | 第93页 |
| 1 材料与方法 | 第93-95页 |
| ·植物材料 | 第93-94页 |
| ·试剂与仪器 | 第94页 |
| ·实验方法 | 第94-95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-98页 |
| ·不同浓度硝酸盐处理下CmNRT2.1、CmNRT2.4、CmNAR2.1表达分析 | 第95-97页 |
| ·5mM铵盐处理下CmNRT2.1、CmNRT2.4、CmNAR2.1表达分析 | 第97页 |
| ·谷氨酰胺处理下CmNRT2.1、CmNRT2.4、CmNAR2.1表达分析 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98-100页 |
| 第六章 菊花CmNRT基因的功能分析 | 第100-134页 |
| 第一节 CmNRT2.1、CmNRT2.4和CmNAR2.1蛋白互作 | 第100-116页 |
| 摘要 | 第100-101页 |
| 1 材料与方法 | 第101-107页 |
| ·植物材料 | 第101页 |
| ·试剂与仪器 | 第101-103页 |
| ·实验方法 | 第103-107页 |
| 2 结果与分析 | 第107-114页 |
| ·CmNRT2.1、CmNRT2.4和CmNAR2.1酵母表达载体构建 | 第107-108页 |
| ·酵母双杂交系统验证蛋白互作 | 第108-110页 |
| ·CmNRT2.1、CmNRT2.4和CmNAR2.1 pEarleyGate103载体构建 | 第110-111页 |
| ·CmNRT2.1、CmNRT2.4和CmNAR2.1 pSAT4A载体构建 | 第111-112页 |
| ·CmNRT2.1、CmNRT2.4和CmNAR2.1亚细胞定位及BiFC | 第112-114页 |
| 3 讨论 | 第114-116页 |
| 第二节 CmNRT2.1、CmNRT2.4和CmNAR2.1基因拟南芥转化研究 | 第116-134页 |
| 摘要 | 第116-117页 |
| 1 材料与方法 | 第117-122页 |
| ·植物材料 | 第117页 |
| ·试剂与仪器 | 第117页 |
| ·实验方法 | 第117-122页 |
| 2 结果与分析 | 第122-131页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第122-123页 |
| ·转基因拟南芥的获得及分子鉴定 | 第123-127页 |
| ·转基因拟南芥的功能分析 | 第127-131页 |
| 3 讨论 | 第131-134页 |
| 全文结论及创新之处 | 第134-136页 |
| 全文结论 | 第134-135页 |
| 创新之处 | 第135-136页 |
| 参考文献 | 第136-154页 |
| 附录 | 第154-168页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第168-170页 |
| 致谢 | 第170页 |
