中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第1章 绪论 | 第12-21页 |
·玉米螟的危害与防治研究概况 | 第12页 |
·应对植物杀虫化合物的昆虫抗性进化 | 第12-14页 |
·昆虫谷胱甘肽转移酶的研究及应用 | 第14-18页 |
·谷胱甘肽转移酶的分类及功能 | 第14-15页 |
·GST蛋白的空间结构 | 第15-17页 |
·昆虫GST的研究进展 | 第17-18页 |
·cDNA文库技术简介 | 第18-19页 |
·蛋白质组学在昆虫研究中的运用 | 第19页 |
·RNAi干扰技术及其在昆虫研究中的运用 | 第19-20页 |
·本研究目的与意义 | 第20-21页 |
第2章 响应茉莉酸甲酯诱导玉米抗性亚洲玉米螟中肠cDNA文库及玉米螟Unigenes数据库的构建 | 第21-42页 |
·材料与方法 | 第21-28页 |
·供试植物与昆虫 | 第21页 |
·本试验使用的数据和主要软件 | 第21页 |
·主要试剂及仪器 | 第21-22页 |
·外援茉莉酸甲酯对玉米幼苗的处理 | 第22页 |
·诱导后叶片的亚洲玉米螟饲喂试验 | 第22页 |
·亚洲玉米螟中肠总RNA的提取 | 第22页 |
·cDNA第一链的合成 | 第22-23页 |
·cDNA第二链的合成 | 第23-24页 |
·dsDNA的纯化 | 第24页 |
·载体构建和电转化 | 第24-26页 |
·文库鉴定 | 第26页 |
·本地数据库的构建 | 第26页 |
·unigenes数据库的BLAST注释 | 第26-27页 |
·本地数据库的验证 | 第27-28页 |
·实验结果和分析 | 第28-39页 |
·取食茉莉酸甲酯诱导玉米叶片的亚洲玉米螟中肠总RNA提取结果 | 第28-29页 |
·dsDNA的合成 | 第29页 |
·cDNA文库质量的鉴定 | 第29-30页 |
·cDNA文库测序结果 | 第30-36页 |
·玉米螟unigenes数据库构建及注释结果 | 第36-38页 |
·unigenes数据库的分子生物学验证结果 | 第38-39页 |
·本章讨论 | 第39-41页 |
·本章小结 | 第41-42页 |
第3章 响应茉莉酸甲酯诱导植物抗性亚洲玉米螟中肠定量蛋白质组学研究 | 第42-67页 |
·材料与方法 | 第42-46页 |
·供试昆虫、植物与饲喂试验 | 第42页 |
·主要试剂及仪器 | 第42-43页 |
·总蛋白提取及定量 | 第43页 |
·iTRAQ标记与质朴鉴定 | 第43页 |
·数据分析 | 第43页 |
·差异表达蛋白基因片段的克隆 | 第43-45页 |
·差异表达蛋白半定量PCR验证 | 第45页 |
·HT115-OfAk RNAi干扰工程菌及HT115-OfCat RNAi干扰工程菌构建及功能验证 | 第45-46页 |
·实验结果结果 | 第46-60页 |
·差异表达倍数的确定 | 第46-47页 |
·茉莉酸处理前后亚洲玉米螟中肠差异表达蛋 | 第47-51页 |
·差异表达蛋白的功能分类 | 第51-53页 |
·差异蛋白表达模式聚类分析 | 第53-54页 |
·差异表达蛋白扩增片段PCR扩增 | 第54-58页 |
·差异表达蛋白基因半定量PCR验证 | 第58-59页 |
·HT115-OfAk RNAi干扰工程菌及HT115-OfCat RNAi干扰工程菌构建及功能验证 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-66页 |
·蛋白提取方法对亚洲玉米螟三龄幼虫中肠总蛋白提取的影响 | 第60页 |
·使用iTRAQ进行亚洲玉米螟中肠蛋白质组学研究的优势 | 第60-61页 |
·亚洲玉米螟响应经茉莉酸诱导玉米叶片蛋白表达模式图 | 第61-64页 |
·中肠内含物中的差异表达蛋白可能具有更高的研究价值 | 第64-65页 |
·表达蛋白的表达水平半定量分析 | 第65页 |
·HT115-OfAK和HT115-OfCat RNAi工程菌活性分析 | 第65-66页 |
·本章小结 | 第66-67页 |
第4章 亚洲玉米螟中肠GST基因片段克隆与功能研究及RNAi干扰载体构建 | 第67-89页 |
·材料与方法 | 第67-71页 |
·供试昆虫与植物 | 第67页 |
·主要试剂与仪器 | 第67页 |
·亚洲玉米螟GSTs基因的预测与分析 | 第67页 |
·亚洲玉米螟中肠GSTs基因的克隆 | 第67-69页 |
·半定量PCR | 第69页 |
·亚洲玉米螟OfGSTd1的功能研究 | 第69-70页 |
·HT115-OfGSTd1 RNAi干扰载体构建 | 第70页 |
·HT115-OfGSTd1 RNAi干扰载体功能验证 | 第70页 |
·HT115-OfGSTe1 RNAi干扰工程菌构建 | 第70-71页 |
·四种农药对亚洲玉米螟致死浓度的测定 | 第71页 |
·OfGSTe1的功能检测 | 第71页 |
·实验结果与分析 | 第71-86页 |
·玉米螟GSTs基因的预测结果 | 第71-72页 |
·亚洲玉米螟GSTs基因的克隆结果 | 第72页 |
·测序结果及分析 | 第72-76页 |
·半定量PCR验证 | 第76-78页 |
·丁布对亚洲玉米螟三龄幼虫OfGSTd1的诱导表达 | 第78-81页 |
·HT115-OfGSTd1 RNAi干扰工程菌构建 | 第81页 |
·HT115-OfGSTd1功能验证 | 第81-82页 |
·OfGSTE1基因RNAi干扰载体的构建 | 第82-83页 |
·几种农药对亚洲玉米螟致死浓度的测定 | 第83-84页 |
·RNAi工程菌HT115-OfGSTe1饲喂试验结果 | 第84-86页 |
·Ht115-OfGSTe1 RNAi干扰工程菌干扰效果RT-PCR验证 | 第86页 |
·讨论 | 第86-88页 |
·本章小结 | 第88-89页 |
第5章 结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-103页 |
附录 | 第103-109页 |
致谢 | 第109-111页 |