| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-15页 |
| 2 实验材料与方法 | 第15-30页 |
| ·实验材料 | 第15-18页 |
| ·菌株与质粒及病毒 | 第15页 |
| ·抗体与试剂 | 第15-16页 |
| ·细胞株 | 第16页 |
| ·主要仪器与设备 | 第16-17页 |
| ·主要溶液配制 | 第17-18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-30页 |
| ·pShuttle-shGFP 和 pShuttle-shTNIK 质粒的转化和抽提 | 第18-19页 |
| ·质粒转染 | 第19页 |
| ·泛素分析 | 第19页 |
| ·实时定量 PCR 分析 | 第19-21页 |
| ·Western blotting 检测蛋白表达 | 第21-23页 |
| ·蛋白抽提 | 第21-22页 |
| ·BCA 蛋白定量试剂盒比色法 | 第22页 |
| ·western blotting | 第22-23页 |
| ·免疫共沉淀和 Western blotting 检测 TNIK 蛋白相互作用蛋白 | 第23-24页 |
| ·病毒的大量扩增、纯化及滴度测定 | 第24-27页 |
| ·病毒的大量扩增与纯化 | 第24-26页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第26-27页 |
| ·MTT 法检测细胞存活率 | 第27页 |
| ·细胞病变效应（CPE）实验 | 第27-28页 |
| ·凋亡细胞染色实验：Hoechst 33342 染色 | 第28页 |
| ·流式实验分析 | 第28页 |
| ·裸鼠 7404 肝癌移植瘤模型的建立及分组治疗 | 第28-30页 |
| ·肿瘤抑制曲线的绘制 | 第28-29页 |
| ·给药肿瘤组织的免疫病理学检测 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-47页 |
| ·成功扩增并纯化病毒，Ad-shTNIK 病毒的最终滴度大约为 1.47×1010/mL，Ad-shGFP 病毒的最终滴度大约为 2.11×1010/mL | 第30页 |
| ·TNIK 对于 TNFα引起的 NF-κB 的活化是必需的 | 第30-36页 |
| ·TNIK 蛋白水平受 TNFα影响 | 第30-31页 |
| ·TNIK 蛋白的下调是通过蛋白酶体调节的 | 第31-33页 |
| ·TNIK 蛋白可以通过泛素化来调节，并经历蛋白酶体调节的下调 | 第33-34页 |
| ·TNIK 对 TNFα引起的 NF-κB 活化是必不可少的 | 第34-36页 |
| ·体外实验证明溶瘤腺病毒 Ad-shTNIK 抑制癌细胞生长 | 第36-44页 |
| ·MTT 法检测目的病毒对癌细胞的杀伤能力与安全性评价 | 第36-40页 |
| ·结晶紫实验检测细胞病变效应 | 第40-42页 |
| ·Hochest 33342 染色观察细胞凋亡现象 | 第42页 |
| ·流式细胞分析 | 第42-44页 |
| ·体内实验证明溶瘤腺病毒 Ad-shTNIK 抑制癌细胞生长 | 第44-47页 |
| ·Ad-shTNIK 抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长 | 第44页 |
| ·病理学相关实验检测 Ad-shTNIK 体内抑癌效果 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 在学期间的研究成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
