| 学位论文数据集 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-24页 |
| ·5-羟基色氨酸概况 | 第15-16页 |
| ·5-羟基色氨酸的分布与性质 | 第15-16页 |
| ·5-羟基色氨酸的现阶段生产方式 | 第16页 |
| ·TPH 概况 | 第16-19页 |
| ·色氨酸羟化酶的性质与分布 | 第16-17页 |
| ·色氨酸羟化酶的 mRNA 序列 | 第17-18页 |
| ·色氨酸羟化酶的应用 | 第18-19页 |
| ·色氨酸羟化酶 2 的分析 | 第19-21页 |
| ·色氨酸羟化酶-2 cDNA 序列分析 | 第19页 |
| ·色氨酸羟化酶-2 的 ORF 识别分析 | 第19页 |
| ·TPH2 的密码子偏好性分析 | 第19-20页 |
| ·色氨酸羟化酶-2 功能结构域分析 | 第20页 |
| ·色氨酸羟化酶-2 三级结构预测 | 第20-21页 |
| ·表达系统 | 第21-23页 |
| ·课题研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 色氨酸羟化酶-2 在大肠杆菌中的重组与表达 | 第24-38页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·培养基配方 | 第24-25页 |
| ·菌种及质粒 | 第25页 |
| ·工具酶以及试剂 | 第25页 |
| ·工程菌 pET 28a-TPH-2/BL21 的构建 | 第25-35页 |
| ·基因克隆 | 第25-27页 |
| ·酶切与连接 | 第27-29页 |
| ·感受态制备 | 第29页 |
| ·阳性筛选 | 第29-31页 |
| ·生物量 | 第31-32页 |
| ·粗酶液 | 第32页 |
| ·蛋白电泳 | 第32-33页 |
| ·蛋白量 | 第33-35页 |
| ·酶学体系及产物检测 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 色氨酸羟化酶-2 基因在肺炎克雷伯氏杆菌的重组与表达 | 第38-50页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·所需培养基及溶液配方 | 第38页 |
| ·实验菌种及质粒 | 第38页 |
| ·工具酶以及试剂 | 第38-39页 |
| ·工程菌 pET-PK-TPH-2/k.p 的构建 | 第39-43页 |
| ·基因克隆 | 第39-40页 |
| ·双酶切与及连接 | 第40-41页 |
| ·感受态制备 | 第41页 |
| ·阳性筛选 | 第41-42页 |
| ·肺炎克雷伯杆菌感受态制备 | 第42页 |
| ·重组质粒在肺炎克雷伯杆菌（k.p）的转化与菌落 PCR 验证 | 第42-43页 |
| ·诱导表达 | 第43-47页 |
| ·生物量 | 第44-45页 |
| ·粗酶液 | 第45页 |
| ·蛋白电泳 | 第45-46页 |
| ·蛋白量 | 第46-47页 |
| ·酶学体系以及产物检测 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第四章 TPH-2 基因在毕赤酵母中重组构建与表达 | 第50-75页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·培养基配方 | 第50-51页 |
| ·所需菌株以及质粒 | 第51页 |
| ·工具酶和试剂 | 第51页 |
| ·pPICZαA-TPH-2/GS115 与 pPIC3.5k-TPH-2/GS115 工程菌的构建 | 第51-62页 |
| ·基因克隆 | 第51-52页 |
| ·酶切连接 | 第52-55页 |
| ·感受态 | 第55页 |
| ·重组验证 | 第55-56页 |
| ·线性化 | 第56-57页 |
| ·感受态 | 第57-58页 |
| ·pPICZαA-TPH-2/GS115 基因工程菌构建 | 第58-59页 |
| ·pPIC3.5k-TPH-2/GS115 多克隆拷贝的筛选 | 第59-62页 |
| ·pPICZαA-TPH-2/GS115 基因工程菌诱导表达 | 第62-69页 |
| ·生物量 | 第62-65页 |
| ·蛋白含量测定以及单位蛋白的核算 | 第65-67页 |
| ·目的蛋白的纯化以及蛋白电泳验证 | 第67-69页 |
| ·酶学体系及产物检测鉴定 | 第69-73页 |
| ·酶学体系的建立与酶学反应 | 第69页 |
| ·5-HTP 标准曲线的绘制 | 第69-70页 |
| ·产物检测 | 第70-73页 |
| ·2.5L 发酵罐 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第五章 结论与展望 | 第75-79页 |
| ·结论 | 第75-76页 |
| ·展望 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 作者与导师简介 | 第83页 |
