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链霉菌Streptomyces sp.LZ35中TetR家族对次级代谢调控机制的研究

目录第1-7页
Table of Contents第7-10页
摘要第10-11页
ABSTRACT第11-15页
第一章 文献综述第15-27页
   ·TetR家族的结构、功能与分布第15-17页
   ·链霉菌中TetR家族的研究进展第17-26页
     ·TetR家族在链霉菌中的分布与分类第17-19页
     ·GBL受体第19-22页
     ·MMF受体第22-23页
     ·假GBL受体第23-25页
     ·抗性相关受体第25页
     ·孤儿受体第25-26页
   ·展望第26-27页
第二章 材料与方法第27-47页
   ·实验材料第27-36页
     ·实验中用的菌株第27-28页
     ·实验中用的质粒第28页
     ·实验中用的引物第28-31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要仪器第31-32页
     ·培养基的配制第32-33页
     ·主要试剂的配制第33-35页
     ·常用抗生素的配制第35-36页
   ·常用实验方法第36-47页
     ·大肠杆菌和放线菌的培养及保藏第36页
     ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取第36页
     ·放线菌总DNA的少量快速提取第36-37页
     ·链霉菌孢子悬液的制备第37页
     ·DNA片段的胶回收第37页
     ·PCR产物的纯化第37页
     ·PCR反应第37-38页
     ·DNA酶切,酶连第38-39页
     ·DNA的琼脂糖凝胶电泳第39页
     ·大肠杆菌钙转感受态细胞的制备第39-40页
     ·质粒DNA的转化(氯化钙法)第40页
     ·大肠杆菌电转感受态细胞的制备第40页
     ·质粒DNA的转化(电穿孔法)第40-41页
     ·PCR-Targeting的方法敲除目的基因第41-42页
     ·属间接合转移第42页
     ·突变株的发酵、提取和检测第42-43页
     ·蛋白表达第43-44页
     ·蛋白的大规模纯化第44-45页
     ·SDS-PAGE电泳第45-46页
     ·凝胶阻滞实验第46-47页
第三章 结果与分析第47-75页
   ·GBL受体蛋白LZ35_7692的功能研究第47-66页
     ·生物信息学分析第47-48页
     ·LZ35_7692蛋白的表达、纯化与结晶第48-55页
     ·LZ35_7692能够结合到LZ35_7692和LZ35_7693的中间区域第55-58页
     ·LZ35_7692基因可能阻遏LZ35菌株的次级代谢第58-66页
   ·两个γ-丁酸内酯合酶LZ35_7693和LZ35_8405的功能研究第66-69页
     ·LZ35_7693基因的敲除及验证第66-67页
     ·LZ35_8405基因的敲除及验证第67页
     ·LZ35△7693的表型变化第67-68页
     ·LZ35△7693和LZ35△8405代谢产物的检测与分析第68-69页
   ·八个途径特异性TetR家族蛋白的功能研究第69-75页
     ·八个途径特异性调控基因的敲除与验证第69-70页
     ·八个途径特异性调控基因敲除突变株代谢产物的检测与分析第70-75页
第四章 结论与讨论第75-77页
参考文献第77-84页
研究生期间发表论文第84-85页
致谢第85-86页
学位论文评阅及答辩情况表第86页

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