摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
插图和附表清单 | 第9-12页 |
1 文献综述 | 第12-36页 |
·卵菌纲病原菌 | 第12-16页 |
·大豆疫霉 | 第13-15页 |
·马铃薯致病疫霉 | 第15-16页 |
·卵菌的效应子 | 第16-23页 |
·无毒基因的结构 | 第17-18页 |
·已克隆无毒基因 | 第18-20页 |
·卵菌效应子向寄主细胞的运输 | 第20-23页 |
·卵菌效应子及其致病性 | 第23页 |
·病原菌与寄主植物的互作 | 第23-31页 |
·植物免疫系统 | 第24-28页 |
·植物抗病反应 | 第28-29页 |
·植物与病原菌的协同进化 | 第29-31页 |
·分离群体分组分析法和新一代测序技术相结合克隆病原菌的无毒基因 | 第31-34页 |
·分离群体分组分析法 | 第32页 |
·新一代测序技术 | 第32-34页 |
·本研究的目的及意义 | 第34-36页 |
2 无毒基因 Avr1d 的克隆 | 第36-70页 |
·材料与方法 | 第36-51页 |
·培养基 | 第36页 |
·供试大豆材料 | 第36页 |
·大豆幼苗的培养 | 第36页 |
·大豆疫霉菌致病性测定 | 第36-37页 |
·用于 mapping Avr1d 基因群体的获得 | 第37页 |
·目的基因的克隆和细菌转化 | 第37-43页 |
·序列分析 | 第43页 |
·序列多态性比对及 CAPs 标记的设计 | 第43-46页 |
·利用基因枪瞬时表达目的基因 | 第46-48页 |
·GUS 顺时表达分析 | 第48页 |
·AVR1d 蛋白的表达及纯化 | 第48-49页 |
·蛋白-脂类互作试验 | 第49-50页 |
·蛋白-脂质体互作试验 | 第50-51页 |
·结果与分析 | 第51-69页 |
·RXLR 效应子 Avh6 的基因型与 Avr1d 的表型紧密连锁 | 第51-57页 |
·单倍体型和转录分析 Avr1d 基因 | 第57-60页 |
·无毒基因 Avr1d 的功能分析 | 第60-64页 |
·无毒基因 Avr1d 的缺失导致菌株对含有 Rps1d 抗病基因植株的致病性 | 第64-65页 |
·Avr1d 蛋白与 phosphatidylinositol 4-phosphate 的互作 | 第65-69页 |
·结论 | 第69-70页 |
·Avh6 基因型与 Avr1d 表型共分离 | 第69页 |
·无毒基因 Avr1d 的缺失导致大豆疫霉菌对 Rps1d 的大豆植株的致病性 | 第69页 |
·RFLR 保守区域不能转运无毒基因 Avr1d 进入大豆细胞 | 第69页 |
·Avr1d 的效应子区与 PI4P 脂质体相结合 | 第69-70页 |
3 无毒基因 Avr1c 克隆 | 第70-91页 |
·材料与方法 | 第70-73页 |
·分离群体分组分析法 | 第70-71页 |
·氨基酸序列比对 | 第71页 |
·本章节中用到的引物序列 | 第71-73页 |
·结果与分析 | 第73-88页 |
·Avr1c 为单显性基因 | 第73页 |
·测试 24 个候选 Avh 基因的基因型是否与 Avr1c 的表型连锁 | 第73-75页 |
·确定与 Avr1c 连锁的单核苷酸多态性位点 | 第75-77页 |
·精细作图显示确定 Avr1c 在 p.sojae scaffold_7 的一个基因 cluster 中 | 第77-86页 |
·Avr1c 功能的鉴定 | 第86-87页 |
·Avr1c 在不同生理小种中单倍体型分析 | 第87-88页 |
·Avr1c 的缺失导致有些大豆疫霉生理小种的致病性 | 第88页 |
·结论 | 第88-91页 |
·测试的 24 个候选 Avh 基因的基因型均与 Avr1c 的表型不连锁 | 第88-89页 |
·确定无毒基因 Avr1c 在基因组上的位置 | 第89页 |
·精细作图确定了 Avr1c 在 p.sojae scaffold 7 的一个基因 cluster 中 | 第89页 |
·功能验证试验结果表明 Avh275c 是 Avr1c | 第89-90页 |
·Avr1c 在基因组中的缺失导致大豆疫霉对 Rps1c 植株具有致病性 | 第90-91页 |
4 马铃薯抗晚疫病(P.infestans)机制的研究 | 第91-99页 |
·材料与方法 | 第91-92页 |
·供试马铃薯材料 | 第91页 |
·马铃薯晚疫病菌游动孢子悬浮液的制备 | 第91页 |
·接种方法 | 第91页 |
·H_2O_2定性检测 | 第91页 |
·抗性相关基因转录水平检测 | 第91-92页 |
·结果 | 第92-98页 |
·马铃薯抗病品种的鉴定 | 第92-93页 |
·ROS 介入到了紫花白对 P.infestans 的抗病过程中 | 第93-95页 |
·马铃薯抗感品种接种前后 ROS 清除酶活性的变化 | 第95-96页 |
·StRboh 基因调控活性氧在抗病品种紫花白中的积累 | 第96-97页 |
·水杨酸信号转导路径参加了马铃薯对晚疫病抗病建立过程 | 第97-98页 |
·结论 | 第98-99页 |
·ROS 介入了马铃薯抗病品种紫花白对晚疫病菌的抗性建立过程 | 第98页 |
·SA 信号转导途径在马铃薯抗性建立过程中的重要作用 | 第98-99页 |
5 讨论 | 第99-106页 |
·候选 RXLR 效应子的正确筛选有助于无毒基因的克隆 | 第99页 |
·无毒基因 Avr1d 的克隆有赖于对候选 Avh 基因的分析 | 第99页 |
·对 Avh 基因的分析并没有给 Avr1c 的克隆提供帮助 | 第99页 |
·寻找与 Avr1c 连锁的单核苷酸多态性位点 | 第99-100页 |
·Avr1c 和 Avr1d 无毒基因在基因组上的缺失导致大豆疫霉病菌致病性 | 第100-101页 |
·无毒基因的转运 | 第101-102页 |
·无毒基因的跨膜转运的保守区域 | 第101-102页 |
·无毒基因的跨膜转运的机制 | 第102页 |
·植物病原菌的进化 | 第102-104页 |
·马铃薯的抗晚疫病病机制 | 第104-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-124页 |
作者简介 | 第124页 |