共附生微生物抗肿瘤活性菌的筛选、鉴定及活性产物的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 抗肿瘤药物的发展与分类 | 第9-11页 |
| ·抗肿瘤药物发展史 | 第9-11页 |
| ·抗肿瘤药物的分类 | 第11页 |
| ·矿物药物 | 第11页 |
| ·动物药物 | 第11页 |
| ·植物药物 | 第11页 |
| ·微生物药物 | 第11页 |
| 2 抗肿瘤药物的筛选模型 | 第11-13页 |
| ·体内筛选模型 | 第12页 |
| ·体外筛选模型 | 第12-13页 |
| ·基于作用机理的筛选模型 | 第13页 |
| 3 共附生微生物资源的特点及其活性物质 | 第13-17页 |
| ·海洋共附生微生物 | 第14-15页 |
| ·海洋微生物的特点及其多样性 | 第14-15页 |
| ·海绵共附生微生物的特点 | 第15页 |
| ·植物内生菌 | 第15-17页 |
| ·植物内生菌的特点及其多样性 | 第15-16页 |
| ·植物内生菌的活性产物研究进展 | 第16-17页 |
| 4 本研究目的、意义及内容 | 第17-19页 |
| 第2章 共附生微生物抗肿瘤活性菌的筛选与鉴定 | 第19-30页 |
| 1 试验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株来源 | 第19页 |
| ·活性筛选材料 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| 2 试验方法 | 第20-24页 |
| ·菌株活化 | 第20页 |
| ·海绵共生细菌的活化 | 第20页 |
| ·植物内生真菌的活化 | 第20页 |
| ·发酵培养 | 第20页 |
| ·海绵共生细菌的发酵 | 第20页 |
| ·植物内生真菌的发酵 | 第20页 |
| ·测试样品制备 | 第20-21页 |
| ·肿瘤细胞培养 | 第21页 |
| ·细胞复苏 | 第21页 |
| ·细胞传代和冻存 | 第21页 |
| ·抗肿瘤活性菌株筛选 | 第21-22页 |
| ·SRB法 | 第21-22页 |
| ·MTT法 | 第22页 |
| ·染料排斥法 | 第22页 |
| ·抗肿瘤活性菌株鉴定 | 第22-24页 |
| ·形态特征观察 | 第22页 |
| ·扫描电镜观察 | 第22页 |
| ·rDNA ITS序列分析 | 第22-24页 |
| 3 试验结果 | 第24-28页 |
| ·抗肿瘤活性菌株筛选 | 第24-26页 |
| ·三种方法初筛结果 | 第24页 |
| ·复筛结果 | 第24-26页 |
| ·抗肿瘤活性菌株鉴定 | 第26-28页 |
| ·形态特征观察 | 第26页 |
| ·扫描电镜观察 | 第26-27页 |
| ·rDNA ITS序列分析 | 第27-28页 |
| 4 小结 | 第28-30页 |
| ·抗肿瘤活性菌株筛选 | 第28-29页 |
| ·抗肿瘤活性菌株鉴定 | 第29-30页 |
| 第3章 YX-5发酵条件优化及活性产物稳定性研究 | 第30-42页 |
| 1 试验材料 | 第30页 |
| ·供试菌株 | 第30页 |
| ·指示肿瘤细胞 | 第30页 |
| ·细胞培养基 | 第30页 |
| ·发酵培养基 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-32页 |
| ·真菌发酵条件优化 | 第31页 |
| ·发酵培养基 | 第31页 |
| ·发酵时间 | 第31页 |
| ·发酵温度 | 第31页 |
| ·发酵培养基pH | 第31页 |
| ·摇床转速 | 第31页 |
| ·活性物质稳定性研究 | 第31-32页 |
| ·热稳定性 | 第32页 |
| ·酸碱稳定性 | 第32页 |
| ·UV稳定性 | 第32页 |
| ·抗蛋白酶稳定性 | 第32页 |
| 3 试验结果 | 第32-40页 |
| ·真菌发酵条件优化 | 第32-37页 |
| ·发酵培养基 | 第32-33页 |
| ·发酵时间 | 第33-34页 |
| ·发酵温度 | 第34-35页 |
| ·发酵培养基pH | 第35-36页 |
| ·摇床转速 | 第36-37页 |
| ·活性物质稳定性研究 | 第37-39页 |
| ·热稳定性 | 第37-38页 |
| ·酸碱稳定性 | 第38-39页 |
| ·UV稳定性 | 第39页 |
| ·抗蛋白酶稳定性 | 第39-40页 |
| 4 小结 | 第40-42页 |
| ·真菌的发酵条件 | 第40-41页 |
| ·活性产物稳定性 | 第41-42页 |
| 第4章 YX-5抗肿瘤活性产物的分离和鉴定 | 第42-52页 |
| 1 试验材料 | 第42页 |
| ·供试菌株 | 第42页 |
| ·指示肿瘤细胞 | 第42页 |
| ·发酵培养基 | 第42页 |
| ·细胞培养基 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| 2 试验方法 | 第42-44页 |
| ·YX-5规模发酵 | 第42-43页 |
| ·发酵产物提取 | 第43页 |
| ·发酵产物分离 | 第43-44页 |
| ·粗提物初分离 | 第43页 |
| ·活性产物柱层析分离 | 第43-44页 |
| ·活性产物鉴定 | 第44页 |
| ·GC-MS分析 | 第44页 |
| ·核磁共振分析 | 第44页 |
| 3 试验结果 | 第44-51页 |
| ·发酵产物提取 | 第44-45页 |
| ·发酵产物分离 | 第45-50页 |
| ·粗提物初分离 | 第45页 |
| ·活性物质柱层析分离 | 第45-50页 |
| ·活性产物鉴定 | 第50-51页 |
| ·GC-MS分析 | 第50页 |
| ·核磁共振分析 | 第50-51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 第5章 讨论与总结 | 第52-56页 |
| 1 讨论与总结 | 第52-55页 |
| ·抗肿瘤活性菌株筛选 | 第52页 |
| ·菌株鉴定及其活性产物 | 第52-55页 |
| 2 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附图 | 第62-64页 |
| 附表 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
