| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 1. 前言 | 第9-20页 |
| ·拓扑异构酶 | 第9-11页 |
| ·DNA拓扑异构酶分类 | 第9-10页 |
| ·拓扑异构酶Ⅰ | 第10页 |
| ·拓扑异构酶Ⅱ | 第10-11页 |
| ·DNA拓扑异构酶的作用 | 第11-14页 |
| ·DNA拓扑异构酶催化反应机理 | 第11-13页 |
| ·DNA螺旋与拓扑异构酶相互作用的新发现 | 第13-14页 |
| ·DNA拓扑异构酶Ⅰ基因Top1的克隆与功能研究 | 第14-16页 |
| ·DNA拓扑异构酶Ⅰ亟待研究的内容 | 第16-17页 |
| ·半定量RT-PCR | 第17页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第17-19页 |
| ·实时荧光定量PCR原理 | 第17-18页 |
| ·Ct值的意义 | 第18页 |
| ·荧光阈值(threshold)的设定 | 第18页 |
| ·Ct值与起始模板的关系 | 第18页 |
| ·荧光化学 | 第18-19页 |
| ·本研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-26页 |
| ·供试材料 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-26页 |
| ·试剂配制 | 第20-21页 |
| ·玉米ZmTop1的分子克隆 | 第21页 |
| ·基因表达分析材料处理与取样 | 第21页 |
| ·RNA提取与检测 | 第21-22页 |
| ·实验准备 | 第21-22页 |
| ·Trizol法提取总RNA | 第22页 |
| ·RNA完整性及纯度检测 | 第22页 |
| ·反转录PCR | 第22-23页 |
| ·半定量表达分析 | 第23-24页 |
| ·定量表达分析 | 第24页 |
| ·生物信息学分析 | 第24-26页 |
| 3. 结果与分析 | 第26-39页 |
| ·总RNA提取与检测 | 第26页 |
| ·玉米拓扑异构酶Ⅰ基因全长cDNA序列的获得 | 第26-28页 |
| ·拓扑异构酶Ⅰ的序列比对与系统发生分析 | 第28-31页 |
| ·玉米拓扑异构酶Ⅰ的保守结构域分析 | 第31-32页 |
| ·启动子分析与亚细胞定位 | 第32-33页 |
| ·玉米不同组织中ZmTop1基因差异表达分析 | 第33-34页 |
| ·ZmTop1基因定量表达分析 | 第34-39页 |
| ·ZmTop1在非生物胁迫条件下mRNA转录水平比较 | 第34-36页 |
| ·激素处理对叶及根中ZmTop1表达的影响 | 第36-37页 |
| ·不同激素浓度处理后叶、根中ZmTop1表达量的变化 | 第37-39页 |
| 4. 小结与讨论 | 第39-43页 |
| ·综合策略分离ZmTop1基因全长cDNA序列 | 第39页 |
| ·长距离PCR确保ZmTop1基因序列拼接的正确性 | 第39-40页 |
| ·ZmTop1基因启动子和催化区域的序列特征 | 第40-41页 |
| ·ZmTop1基因的表达模式 | 第41页 |
| ·数据库信息挖掘与利用助推ZmTop1基因的研究 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 基金资助 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
