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拟南芥DHHC型锌指蛋白基因At5g04270分离鉴定与功能生化分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
插图索引第12-15页
附表索引第15-16页
英文缩写词第16-18页
第1章 绪论第18-34页
   ·激活标签法的研究背景和研究进展第18-20页
     ·功能基因组学及其研究方法第18-19页
     ·激活标签法构建突变体库第19-20页
   ·DHHC型锌指蛋白的研究背景和研究进展第20-27页
     ·锌指蛋白的结构第20-21页
     ·锌指蛋白的类型第21-22页
     ·锌指蛋白的作用第22-24页
     ·DHHC型锌指蛋白第24-25页
     ·DHHC锌指蛋白具有蛋白质酰基转移酶活性第25-26页
     ·DHHC锌指结构域在植物中的研究第26-27页
   ·植物分枝机制的研究进展第27-32页
     ·植物腋生分生组织形成机理第27-29页
     ·植物腋生分生组织生长发育机理第29-32页
   ·本论文工作设想第32-34页
第2章 拟南芥激活标签突变体的筛选及其表型分析第34-51页
   ·材料和方法第34-42页
     ·植物材料第34页
     ·菌株第34-35页
     ·主要试剂药品第35页
     ·培养基的配制第35-36页
     ·激活标签载体的构建第36-37页
     ·拟南芥的种植第37页
     ·拟南芥的农杆菌转化第37-38页
     ·激活标签突变体的筛选第38页
     ·IPCR确定T-DNA突变体插入位点第38-40页
     ·拟南芥总RNA的提取第40页
     ·半定量RT-PCR第40-42页
     ·拟南芥分枝数的统计第42页
   ·结果与分析第42-49页
     ·突变体的筛选第42-43页
     ·突变体scc10-D的表型分析第43-46页
     ·scc10-D突变体T-DNA插入位点的鉴定第46-47页
     ·scc10-D突变体T-DNA插入位点毗邻基因的表达分析第47-49页
   ·小结第49-51页
第3章 拟南芥DHHC型锌指蛋白基因At5g04270的功能分析第51-67页
   ·材料与方法第51-58页
     ·植物材料第51页
     ·菌种第51页
     ·酶和试剂第51-52页
     ·拟南芥总RNA的提取第52页
     ·PCR产物的凝胶电泳纯化回收第52-53页
     ·目的基因的克隆第53-57页
     ·拟南芥的农杆菌转化第57页
     ·pEGAD-At5g04270过表达纯合植株的获得第57页
     ·拟南芥总DNA提取第57页
     ·拟南芥At5g04270基因T-DNA插入突变体纯合子的分子鉴定第57-58页
     ·拟南芥植株茎分枝数的统计第58页
   ·结果与分析第58-66页
     ·pEGAD-At5g04270表达载体的构建第58-61页
     ·拟南芥At5g04270基因过量表达株系的获得第61页
     ·At5g04270基因过表达株系的分子鉴定第61-62页
     ·At5g04270基因T-DNA插入突变体分子鉴定及纯合株系获得第62-63页
     ·拟南芥At5g04270基因过量表达增加植株的分枝数第63-65页
     ·At5g04270基因在不同组织中的表达第65-66页
   ·小结第66-67页
第4章 拟南芥DHHC型锌指蛋白基因At5g04270的生物信息学分析第67-80页
   ·材料与方法第67-69页
     ·实验材料第67-68页
     ·实验方法第68-69页
   ·结果与分析第69-79页
     ·At5g04270基因的转录调控区元件分析第69-71页
     ·At5g04270氨基酸序列的同源性分析第71-73页
     ·At5g04270蛋白的一级结构分析第73-79页
   ·小结第79-80页
第5章 拟南芥DHHC型锌指蛋白基因At5g04270蛋白质酰基转移酶活性的研究与原核表达载体的构建第80-97页
   ·材料与方法第80-88页
     ·菌种和载体第80-82页
     ·酶和试剂第82页
     ·培养基的配制第82-83页
     ·定点突变获取目的片段第83-84页
     ·目的片段与表达载体的连接第84-86页
     ·质粒对大肠杆菌的转化第86页
     ·测序第86-87页
     ·质粒对酵母的转化第87页
     ·蛋白诱导表达第87-88页
   ·结果与分析第88-96页
     ·克隆拟南芥At5g04270基因的相关引物设计第88-90页
     ·At5g04270基因的全长片段和DHHC定点突变片段的获得第90-91页
     ·pYES260-At5g04270酵母表达载体的构建第91-92页
     ·At5g04270基因酵母过表达株系的获得第92-95页
     ·At5g04270基因片段的克隆与的原核表达载体的构建第95-96页
   ·小结第96-97页
结论第97-99页
参考文献第99-110页
附录A 攻读学位期间学术论文和科研成果目录第110-111页
附录B 营养胁迫对拟南芥4CL基因表达的影响第111-119页
致谢第119页

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