| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 综述 | 第15-25页 |
| ·冷胁迫和转录调控级联机制 | 第16-19页 |
| ·冷胁迫 | 第16页 |
| ·ICE-CBF-COR转录调控级联机制 | 第16-19页 |
| ·植物抗寒基因工程 | 第19-22页 |
| ·导入脂肪酸去饱和代谢关键酶基因的研究 | 第19-20页 |
| ·导入抗氧化酶基因的研究 | 第20-21页 |
| ·导入渗透调节相关基因的研究 | 第21-22页 |
| ·导入抗寒调控基因的研究 | 第22页 |
| ·沙冬青的抗逆特性研究 | 第22-24页 |
| ·抗旱性 | 第23页 |
| ·抗寒性 | 第23页 |
| ·抗盐性 | 第23-24页 |
| ·研究思路 | 第24-25页 |
| 第二章 GPAT基因的克隆及序列分析 | 第25-44页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·酶和试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器及生物软件 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-38页 |
| ·新疆沙冬青总RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·反转录合成第一链cDNA | 第27-28页 |
| ·GPAT基因的PCR扩增 | 第28-34页 |
| ·PCR扩增产物的胶回收 | 第34-35页 |
| ·TA克隆 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第36-37页 |
| ·序列测定与分析 | 第37页 |
| ·GPAT全长序列的鉴定 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·新疆沙冬青GPAT基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·新疆沙冬青GPAT基因的序列分析 | 第39页 |
| ·新疆沙冬青GPAT基因的同源性比对及分子进化分析 | 第39-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 ICE基因的克隆及序列分析 | 第44-54页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第44页 |
| ·同源片段的扩增和克隆 | 第44-45页 |
| ·3' RACE | 第45-46页 |
| ·染色体步移获得5'片段 | 第46-48页 |
| ·DNA序列测定与分析 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·新疆沙冬青ICE基因的克隆 | 第48-49页 |
| ·新疆沙冬青ICEa、ICEb基因的序列分析 | 第49-51页 |
| ·AnICEa、AnICEb基因的同源性和进化分析 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 新疆沙冬青AnGPAT基因的原核表达 | 第54-61页 |
| ·材料与方法 | 第54-58页 |
| ·菌种和载体 | 第54页 |
| ·酶和试剂 | 第54页 |
| ·pET30a-GPAT原核表达载体的构建及转化 | 第54-57页 |
| ·AnGPAT蛋白原核表达 | 第57-58页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-59页 |
| ·pET30a-GPAT重组质粒的酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组质粒pET30a-AnGPAT在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 AnGPAT真核表达载体的构建 | 第61-69页 |
| ·研究材料 | 第62页 |
| ·菌株和质粒 | 第62页 |
| ·主要的酶试剂及试剂盒 | 第62页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-65页 |
| ·实验方案设计 | 第62-63页 |
| ·AnGPAT的获得 | 第63页 |
| ·CaMV 35S-GUS-NOS片段的克隆 | 第63页 |
| ·中间载体pGM-35S-GPAT-NOS的构建 | 第63-64页 |
| ·表达载体p2300-35S-GPAT-NOS的构建 | 第64-65页 |
| ·农杆菌的转化 | 第65页 |
| ·结果与分析 | 第65-67页 |
| ·AnGPAT基因和CaMV 35S-GUS-NOS片段的克隆 | 第65-66页 |
| ·中间载体pGM-35S-GPAT-NOS的构建 | 第66页 |
| ·表达载体p2300-35S-GPAT-NOS的构建 | 第66-67页 |
| ·转化子的鉴定 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
